结核分支杆菌

摘要： 结核病(TB)是一种在全球范围内流行的慢性致死性人畜共患传染病,目前在欧美等发达国家野生及家养动物中感染现象普遍存在,而对于饲养动物,欧美等发达国家以扑杀淘汰为主要防控措施,发展中国家采取的是以抗生素联合抗结核药物治疗为主,淘汰为辅的防控措施,但结核分支杆菌在长期的高浓度药物环境中会出现耐药现象,不仅没有有效的防治结核,而且加重结核分支杆菌对社会的危害性。目前已有30%~75%的广泛耐药结核病患者仍未能被治愈,而对于动物耐药性结核分支杆菌的危害更是无法估量。防治耐药性结核杆菌已成为研究分支杆菌主要的研究重点之一。而外排泵作为耐药的主要原因之一,外排泵在参与菌体生理代谢的同时,对保护菌体阻止药物进入也至关重要,深入研究有助于靶向药物和外排泵抑制剂的研发,目前已研究鉴定的外排泵家族主要有4大区域,论文主要围绕外排泵结构功能及其相关的最新研究,阐述外排泵与耐药的相关性,为耐药结核靶向性药物的研发提供思路及参考。

摘要： 耐多药结核(multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB)是指结核分支杆菌同时对主要的两种一线抗结核药物异烟肼和利福平具有抗药性的结核。据世卫组织(WHO)估算,2018年估计有48.4万例耐多药和利福平耐药结核病病例。利福平耐药患者中的78%耐多药。耐多药肺结核因其病程长、传染性强,对患者及健康人群均造成严重威胁。对可疑MDR?鄄TB患者行痰培养需要较长时间,且一些耐多药肺结核患者痰培养为阴性时,可导致诊断延迟。胸部CT检查方便、快捷,可对疾病早期诊断做出预判,对临床诊断及治疗中监测治疗效果具有重要价值。

摘要： 支气管(内膜)结核属肺外结核,主要发生在支气管黏膜和黏膜下层的结核病。原发性支气管结核病较少发生,一般是由肺部病灶中结核分支杆菌直接植入支气管黏膜,或通过支气管周围组织、血液、淋巴液侵及支气管黏膜[1,2]。支气管结核可能导致患者咳嗽、咯痰、咯血、发热、胸痛、喘息及呼吸困难等症状发生,若长期未得以合理治疗会诱发肺不张,甚至是呼吸衰竭[3,4]。单纯药物治疗可能因支气管本身结构、血供等特点,药物难以到达病灶处,所以往往疗效不理想。

摘要： 目的:研究痰标本中结核分枝杆菌培养和药敏检测结果.方法:选择新型变色液体培养基、改良罗氏培养基对200例痰标本进行结核分枝杆菌培养和药敏测试,对比两种培养方式的结果.结果:经过两种方法检测后,培养阳性率分别为34.5％、33.5％.变色液体培养基实验时间为25d,耐药率为链霉素7.00％、异烟肼4.32％、利福平3.00％、乙胺丁醇3.00％,改良罗氏培养基平均时间为59d,链霉素8.10％、异烟肼5.40％、利福平4.04％、乙胺丁醇4.04％,两种检测方式结果无明显差异,P>0.05.结论:变色液体培养基适用于基层实验室,其能便捷、快速的对结核分枝杆菌进行诊断,具有较高的灵敏度,值得临床推广和借鉴.

摘要： 本研究旨在探究重组CFP10-ESAT6蛋白在结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)感染肺泡上皮细胞过程中对肺泡上皮细胞TLR信号途径及其介导的炎症反应的影响。利用原核表达系统表达纯化Mtb重组蛋白CFP10-ESAT6,使用重组蛋白处理A549细胞,利用CCK-8试剂盒检测重组CFP10-ESAT6对细胞活性的影响;使用重组CFP10-ESAT6和减毒牛分支杆菌BCG处理细胞并设置相应组别,提取细胞总RNA和总蛋白,利用qRT-PCR技术、Western-blot及ELISA方法分别从转录和翻译水平检测A549细胞中TLR信号途径关键分子及其下游炎症因子的表达变化。结果显示,成功获得高纯度的重组CFP10-ESAT6,并且重组CFP10-ESAT6在一定浓度范围和处理时间条件下能够降低A549细胞的存活率。当BCG或重组CFP10-ESAT6单独处理A549细胞时,细胞中TLR2、TLR4、My D88、TRAF6和NF-κB p65及下游炎症因子IL-6和TNF-α的表达水平显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)上调,重组CFP10-ESAT6与BCG共处理时,重组CFP10-ESAT6显著(P<0.05)降低了由BCG刺激所导致的TLR途径关键分子TLR2、TLR4、My D88、TRAF6、NF-κB p65、IL-6及TNF-α等炎症因子的表达水平。上述结果表明,重组CFP10-ESAT6可以减轻A549细胞在抗Mtb感染过程中由TLR信号介导的炎症因子的分泌,这将为进一步加深理解结核病发病机制提供理论依据。

摘要： 结核分支杆菌(T B)与人类社会已经相伴近千年,是人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者最为常见感染的病原体之一。有研究发现,近期世界各国结核病发病率上升与HIV的流行密切相关,较之于HIV阴性人群,结核病发病率在HIV感染者中升高8倍之多。且HIV感染将有可能促进耐多药结核病的流行。此外,HIV与TB这两种病原体可以相互促进对方疾病进展,使得患者受到更加严重的损害。

摘要： microRNAs是广泛存在于真核生物中的小分子非编码RNA,在转录后水平调节多种生物进程,包括细胞分化和发育、免疫反应、凋亡等.microRNA-155是一个多功能的microRNA,研究发现mi-croRNA-155在结核分支杆菌与巨噬细胞互作中发挥着重要的调控作用,巨噬细胞是结核分支杆菌在体内的主要宿主细胞,结核分支杆菌与巨噬细胞互作的结果与结核病的发展密切相关.论文对结核分支杆菌与巨噬细胞互作中microRNA-155调控细胞自噬、细胞凋亡、细胞杀菌能力等作用的研究进展进行综述,以期为结核病的诊断和治疗提供新的思路.

摘要： 目的：通过增加痰液量和超声破碎法提取痰液中的结核菌DNA,提高结核分支杆菌荧光定量PCR的检出率.rn 方法：收集至少5ml的痰液,加入2-3倍体积的4％氢氧化钠液化后,取1ml按照试剂盒操作说明书进行常规法抽提痰液中的结核菌DNA,剩余部分用于改进的超声破碎法提取结核菌DNA;两者同时在罗氏公司的LightCycler 480上进行定量PCR检测.共有206例肺结核患者和103例对照组患者;患者还同时进行结核菌涂片,并在BD公司的MAGIT960仪器上进行液体快速培养结核菌.rn 结果：采用增量超声法,对于涂片阳性,培养阳性的结核患者,阳性检出率由87.5％(可信区间为81.4％-93.6％)提升至95.5％(可信区间为91.7％-99.4％)(p＜0.05).对于涂片阴性,培养阳性的患者,阳性检出率由57.4％(可信区间为47.5％-67.4％),提高至83％(可信区间为75.4％-90.6％)(p＜0.01).增量超声法比常规方法,定量值平均提高14倍以上.rn 结论：通过增加痰液量和超声破碎法提取痰液中的结核菌DNA,显著提高了结核菌的检出率,值得进一步推广应用.

摘要： 结核病是威胁人类健康的一个严重的的全球性公共卫生问题，结核分枝杆菌耐药问题越来越引起人们的重视。耐药结核病的增多与传播，是造成当今世界结核病发病率回升的重要原因之一。因此，加强结核分枝杆菌的检测(监测)和药物敏感试验，分析耐药流行趋势是非常重要的。实验室的数据给临床提供了有力的证据，对治疗结核病，治愈结核病人起着重要的作用。本文对我院2009年住院肺结核病人结核分支杆菌耐药结果作出分析。

摘要： 目的：探讨结核分支杆菌对异烟肼(INH)的耐药分子机制，检测KatG、inhA基因突变在结核分支杆菌对INH耐药性测定中的应用价值。方法：采用PCR和PCR-SSCP方法对95株结核分支杆菌临床分离株和47例耐INH肺结核病人痰标本KatG基因突变进行检测。结果：以结核分支杆菌H37RV为对照，44株药物敏感株的KatG、inhA基因突变率分别为4.5％、0.51株耐INH分离株中，31株KatG基因发生突变，突变率为60.8％；3株inhA基因发生突变，突变率为5.9％。47例耐INH肺结核病人痰标本中，KatG基因44例扩增阳性、inhA基因40例扩增阳性，其基因突变检测率分别为47.7％、7.5％。结论：KatG基因突变是INH耐药性的重要分子机制，inhA基因与INH耐药性有相关性。

摘要： 结核病是威胁人类健康的一个严重的全球性公共卫生问题，结核分枝杆菌耐药问题越来越引起人们的重视。耐药结核病的增多与传播，是造成当今世界结核病发病率回升的重要原因之一。因此，加强结核分枝杆菌的检测(监测)和药物敏感试验，分析耐药流行趋势是非常重要的。实验室的数据给临床提供了有力的证据，对治疗结核病，治愈结核病人起着重要的作用。现对我院2009年住院肺结核病人结核分支杆菌耐药结果分析。

摘要： 结核分支杆菌有特殊生物学特性，髋关节结核不同于普通关节感染治疗，早期病原诊断、有效抗结核化疗是关键。术前充分病灶评估、术中彻底病灶清除，术前与患者及家属充分沟通。

摘要： 目的：利用环介导恒温扩增技术快速扩增结核分枝杆菌DNA,通过电化学传感器对其进行定量检测.rn 方法：1.通过基因比对与引物设计,设计针对结核分枝杆菌的环介导恒温扩增检测(LAMP)方法.2.倍比稀释亚甲基蓝,通过循环伏安法检测,分析其氧化峰电流(ipA)和还原峰电流(ipC),再对氧化峰电流(ipA)和还原峰电流(ipC)进行曲线拟合和回归分析,探讨最佳的拟合曲线,作为亚甲基蓝的标准曲线.3.亚甲基蓝与结核分枝杆菌的环介导恒温扩增产物进行结合,对结核分枝杆菌实现定量检测.rn 结果：1.设计出针对结核分枝杆菌的LAMP引物.2.循环伏安法检测及曲线拟合和回归分析发现,亚甲基蓝浓度和还原峰电流(ipC)的直线回归系数分别为R2=0.9752,拟合效果最好(y=0.0442x+10.106),可以作为亚甲基蓝检测的标准曲线.3.亚甲基蓝与结核分枝杆菌的环介导恒温扩增产物结合试验在下一步试验中进行.rn 结论：本试验设计出了针对结核分枝杆菌的LAMP引物,能够通过电化学传感器对其进行定量检测,可初步用于结核分支杆菌的临床现场检验.亚甲基蓝与结核分枝杆菌的环介导恒温扩增产物结合试验在下一步试验中进行,试验完成后就可实现结核分枝杆菌的定量检测.

摘要： 目的：观察异烟肼、利福平、乙胺丁醇对结核分支杆菌L型的诱导作用以及结核分支杆菌L型在非高渗透压培养基内的某些特性及其抗菌药物敏感性,探讨结核分支杆菌L型形成的机制及其在结核病的发生、诊断及治疗上的意义.rn 方法：将结核分支杆菌接种于含有利福平、异烟肼、乙胺丁醇的非高渗透压培养基内,7天后在显微镜下观察结核分支杆菌L型的形成情况.L型形成后将培养物过滤,获得结核分支杆菌L型纯培养物并对其形态、培养、抗菌药物敏感性等进行观察.rn 结果：结核分支杆菌在中高浓度的利福平、异烟肼、乙胺丁醇的作用下均可形成L型,而在低浓度药物作用下无反应,结核分支杆菌L型对这些抗结核药物不再敏感,但对大环内酯,喹诺酮等抗菌药物均敏感.结核分支杆菌L型在非高渗透压培养基内呈圆形,短杆形,不规则形态,革兰氏染色阴性,短杆形革兰氏染色为阳性,抗酸染色为淡染.rn 结论：利福平、异烟肼、乙胺丁醇能够杀灭结核分支杆菌细菌型,也能够诱导其形成L型而造成这些抗结核药物对结核治疗无效.根据结核分支杆菌L型的药物敏感性结果,建议在使用抗结核药物治疗可联合使用结核分支杆菌L型敏感的抗菌药物进行治疗.

摘要： 目的：获得7种结核分支杆菌(38kD、ESAT-6、CFP10、MPT64、Mtb8、Mtb8.4和Mtb16.3)表位抗原基因，实现38kD-ESAT-6-CFP10和Mtb8.4+MPT64+Mtb16.3+Mtb8嵌合表达，研制新型的结核免疫诊断试剂。rn 方法：通过PCR方法从结核分支杆菌菌株H37Rv基因组中扩增7种抗原基因，并将38kD-ESAT-6-CFP10和Mtb8.4+MPT64+Mtb16.3+Mtb8融合基因分别连接人pBVIL1表达载体，在大肠杆菌菌株HB101中进行表达，建立间接ELISA方法，对研制的试剂进行临床评价。rn 结果：获得了7种结核分支杆菌抗原的基因，并成功实现多种抗原的嵌合表达，获得的抗原具有良好的抗原性。研制出新型的结核免疫诊断试剂，并对其临床应用价值进行了评价。rn 结论：高效表达多种结核分支杆菌抗原，可用于结核病血清学诊断，所研制的新型的结核免疫诊断试剂具有较好的临床应用价值。

摘要： 全球结核病疫情依然严峻，疫苗是控制结核病重要手段。目前唯一使用的结核病疫苗牛分枝杆菌Bacillus Calmette-Guérin(BCG)能为新生儿和儿童提供较好的保护作用,但对成年人的保护作用差异较大且总体较低,导致占社会绝大多数的人群未能得到保护.因此急需开发更有效的疫苗.尽管导致BCG保护效果不佳的原因很多,但是BCG与结核菌之间在免疫原性特征上的本质性区别是无法回避的.分析发现,BCG的出发菌株牛分支杆菌(以牛分支杆菌AF2122_97为例)与人类结核病主要致病菌结核分枝杆菌(以结核分枝杆菌H37Rv为例)相比,基因组相似性大于99.95％,但存在很多的微小的差异,也正是这些微小的差异的一点点的累积导致两个具有相似基因组的细菌却表现出不一样的宿主偏好及毒力.

摘要： 全球结核病疫情依然严峻，疫苗是控制结核病重要手段。目前唯一使用的结核病疫苗牛分枝杆菌Bacillus Calmette-Guérin(BCG)能为新生儿和儿童提供较好的保护作用,但对成年人的保护作用差异较大且总体较低,导致占社会绝大多数的人群未能得到保护.因此急需开发更有效的疫苗.尽管导致BCG保护效果不佳的原因很多,但是BCG与结核菌之间在免疫原性特征上的本质性区别是无法回避的.分析发现,BCG的出发菌株牛分支杆菌(以牛分支杆菌AF2122_97为例)与人类结核病主要致病菌结核分枝杆菌(以结核分枝杆菌H37Rv为例)相比,基因组相似性大于99.95％,但存在很多的微小的差异,也正是这些微小的差异的一点点的累积导致两个具有相似基因组的细菌却表现出不一样的宿主偏好及毒力.

摘要： 本发明为一种分支杆菌快速变色液体培养基及分支杆菌鉴定方法及药敏和MIC测定方法，本发明的快速变色液体培养基是在溶剂为蒸馏水的溶液中含有缓冲系统、基础成分、微量元素成分、促生长剂和混合抗生素，还含有变色剂MTT和/或XTT，变色剂含量为在1000ml溶液中含有5-8mg，该培养基具有快速、培养阳性率高的优点。采用了本发明快速变色液体培养基进行分支杆菌鉴定及药敏和MIC测定，具有快速、简便、准确和可靠的优点，几乎适应于所有抗菌素。

摘要： 本发明提供了结核分枝杆菌蛋白Rv2693c和/或Rv1984c在开发和/或设计具有鉴别、诊断、辅助诊断、筛查和/或辅助筛查潜伏性肺结核感染用途的产品中的应用。本发明还提供了使用这2种结核分枝杆菌蛋白制备的蛋白质芯片。通过本发明制备的蛋白质芯片，检测潜伏性肺结核感染患者及正常人血清中2个蛋白各自相应的IgM抗体的水平，联合分析这2个蛋白质的相应抗体的检测结果，判断被检人是否为潜伏性肺结核感染，检测结果表明，本发明提供的蛋白质芯片辅助诊断潜伏性肺结核感染的最佳工作点的特异性为80.3％，敏感性为75.6％，均高于现有技术中潜伏性肺结核感染诊断的指标。

摘要： 本发明提供了13种结核分枝杆菌蛋白在开发和/或设计具有鉴别、诊断、辅助诊断、筛查和/或辅助筛查潜伏性肺结核感染用途的产品中的应用。本发明还提供了使用该13种结核分枝杆菌蛋白抗原制备的蛋白质芯片。通过本发明制备的蛋白质芯片，检测潜伏性肺结核感染患者及正常人血清中13个蛋白抗原各自相应的IgG抗体的水平，联合分析这13个蛋白质的相应抗体的检测结果，判断被检人是否为潜伏性肺结核感染，检测结果表明，本发明提供的蛋白质芯片辅助诊断潜伏性肺结核感染的最佳工作点的特异性为89.4%，敏感性为80.6%，均高于现有技术中潜伏性肺结核感染诊断的指标。

摘要： 本发明为一种分支杆菌快速变色液体培养基及分支杆菌鉴定方法及药敏和MIC测定方法,本发明的快速变色液体培养基是在溶剂为蒸馏水的溶液中含有缓冲系统、基础成分、微量元素成分、促生长剂和混合抗生素,还含有变色剂MTT和/或XTT,变色剂含量为在1000ml溶液中含有5—8mg,该培养基具有快速、培养阳性率高的优点。采用了本发明快速变色液体培养基进行分支杆菌鉴定及药敏和MIC测定,具有快速、简便、准确和可靠的优点,几乎适应于所有抗菌素。

摘要： 本发明涉及药物领域,更具体地讲,本发明涉及具有抗菌和抗分支杆菌活性的下式所示的新的免疫调节剂该调节剂通过将等摩尔量的6－甲基尿嘧啶－5－磺酰氯和异烟肼在乙腈中于高温下反应制得。该制剂无毒(急性条件下的LD

摘要： 本发明公开一种基于非结核分支杆菌纯蛋白衍生物和重组结核杆菌融合蛋白的产品、应用及使用方法，属于生物蛋白技术领域。通过非结核分支杆菌纯蛋白衍生物和重组结核杆菌融合蛋白（EEC）联合使用，可快速、准确的鉴别结核病和NTM病，当非结核分支杆菌纯蛋白衍生物和重组结核杆菌融合蛋白的迟发性超敏反应均呈全阳性时，为结核病；当非结核分支杆菌纯蛋白衍生物的迟发性超敏反应为呈阳性，重组结核杆菌融合蛋白的迟发性超敏反应为呈阴性时，为NTM病。而提出一种基于非结核分支杆菌纯蛋白衍生物和重组结核杆菌融合蛋白的产品及其应用，进而快速、准确的鉴别结核病和NTM病，为患者的早期诊断和治疗等方面提供可靠的依据。

摘要： 本发明公开了一种检测结核分支杆菌耐药基因的核酸组合物、试剂盒及检测结核分支杆菌耐药性的方法，涉及医学检测技术领域。本发明结合单碱基延伸反应技术，通过确定katG315、rpoB435和embB306基因的待测突变位点，设计出扩增引物和各突变位点的延伸引物，经过PCR扩增、消化处理、延伸反应后使用树脂纯化，纳升点样制备样本并上质谱检测，最终经过比对确定位点突变明细，从而判定结核分支杆菌的对异烟肼、利福平和乙胺丁醇的耐药性。检测结果可广泛应用于临床检验、疾病预防、流行病筛查、进出口检验检疫等领域。

摘要： 本发明提供一种用于检测结核分支杆菌(TB)和非结核分支杆菌(NTM)的核酸扩增产物的检测试纸，其包括：(a)抗生物素蛋白－金释放区域(avidin－goldrelease region)和(b)测试带。本发明还提供一种检测TB和NTM的方法，其包括：(a)扩增具有标记的引物的样本DNA；(b)用电泳缓冲液混合扩增的DNA产物；(c)将所述检测试纸浸入所述混合物中；和(d)使所述混合物流向试纸的反应区。

摘要： 本发明公开了一种快速检测结核分支杆菌复合体与非结核分支杆菌的方法，该方法包括步骤：在特异性扩增条件下，在聚合酶反应体系中进行聚合酶链式反应，所述的反应体系中含有特异性扩增分支杆菌的引物对，还含有分支杆菌属特异性探针和结核分支杆菌复合体特异性探针。本发明还提供了相应的试剂盒。本发明可快速简便地同时检测和鉴定结核分支杆菌复合体与非结核分支杆菌。

摘要： 本发明公开一种基于非结核分支杆菌纯蛋白衍生物和重组结核杆菌融合蛋白的产品、应用及使用方法，属于生物蛋白技术领域。通过非结核分支杆菌纯蛋白衍生物和重组结核杆菌融合蛋白（EEC）联合使用，可快速、准确的鉴别结核病和NTM病，当非结核分支杆菌纯蛋白衍生物和重组结核杆菌融合蛋白的迟发性超敏反应均呈全阳性时，为结核病；当非结核分支杆菌纯蛋白衍生物的迟发性超敏反应为呈阳性，重组结核杆菌融合蛋白的迟发性超敏反应为呈阴性时，为NTM病。而提出一种基于非结核分支杆菌纯蛋白衍生物和重组结核杆菌融合蛋白的产品及其应用，进而快速、准确的鉴别结核病和NTM病，为患者的早期诊断和治疗等方面提供可靠的依据。