表达产物可用IMAC快速纯化的原核表达载体的组建与应用

摘要

以原核高效表达载体ｐＢＶ２２０为肾架载，采用互补寡核苷酸插入法在ｐＢＶ２２０多克隆位点的上游插入了起始密码子和６组氨酸编码序列，将此新南粒命名ｐＢＶ２２２，以此载体表达的目的蛋白在Ｎ－段带有Ｈｉｓ６尾以利于ＩＭＡＣ层析快速纯化目的蛋白，酶切及核革酸序列分析验证了我们的设计，将ＩＬ－２和ＧＭ－ＣＳＦＣＤＮＡ克隆入ｐＢＶ２２２载体中，表达的目的蛋白与预期的分子量相同，表达产物以包涵体的形式存在，表达量