牛凝乳酶基因在毕赤酵母中的重组表达

摘要

通过PCR技术从克隆载体pMDl8T-Prochy上扩增牛凝乳酶原基因,双酶切后定向插入到酵母表达载体pPICZaA中,构建表达质粒pPICZaA-Prochy,线性化后电转化毕赤酵母GSll5,经PCR和测序鉴定凝乳酶原基因成功插入到毕赤酵母的基因组中.在甲醇诱导下进行凝乳酶的表达,SDS-PAGE分析证明重组凝乳酶的分子量约为37 kD,培养基上清液中凝乳酶的活性为12.2 SU/mL.本研究首次应用毕赤酵母表达牛凝乳酶,在培养基中获得分泌表达的重组凝乳酶.为干酪工业提供了新型及优良的凝乳酶来源.