密码子优化增强新城疫病毒DNA疫苗的表达水平和免疫效果

摘要

为提高新城疫病毒(Newcastl Disease Virus,NDV)F基因DNA疫苗的表达量,增强其免疫效果.按照鸡体内偏嗜性密码子人工合成了NDV F48E9株的F基因optiF,插入到真核表达载体pVAX1中获得pVAX1-optiF.将F48E9株的F基因pVAX1-F与pVAX1-optiF分别转染COS-7细胞,72 h后间接免疫荧光和Western blot检测细胞中瞬时表达的F蛋白.将质粒pVAX1、pVAX1-F和pVAX1-opti F以200 μg/只的剂量分别股四头肌多点注射18只2周龄SPF鸡,2周后加强免疫1次,同时设立PBS对照.二免2周后每组取12只鸡以105 EID50的F48E9株NDV强毒进行攻毒,评价这2种DNA疫苗的免疫效果.结果表明,F基因密码子的优化可显著提高NDVDNA疫苗诱导的保护性体液免疫和细胞免疫应答水平,攻毒后所有pVAX1-optiF免疫鸡均获得保护(12/12),而pVAX1-F组保护率只有17%(2/12).DNA疫苗的免疫效果与抗原基因的表达量及表达抗原的免疫原性有直接关系.与未经修饰的F基因相比,修饰后的F基因体外瞬时表达水平明显提高.