左旋咪唑增强新城疫灭活疫苗和DNA疫苗免疫效果的研究

摘要

新城疫是一种急性、高度传染性疾病，主要感染鸟类尤其是禽，因其分布广泛、死亡率高而对养殖业造成巨大的经济损失。实践中常用油佐剂灭活疫苗免疫动物来预防新城疫的感染，但这类疫苗有一定的缺点，如诱导的细胞免疫水平较低，副作用较大。因此为了提高新城疫灭活疫苗的免疫水平，尤其是细胞免疫水平，本研究在小鼠和鸡中评价了改进的左旋咪唑(LMS+)作为佐剂对新城疫灭活疫苗免疫效果的影响。研究结果表明，与传统的油佐剂疫苗相比，新城疫LMS+佐剂疫苗，在不降低体液免疫水平的条件下，能显著提高IL-2、IFN-γ、T细胞增殖和DTH水平，即能增强细胞免疫水平。进一步研究发现，这种佐剂能诱导MHC、共刺激分子的表达和DC细胞的成熟，这表明这种佐剂疫苗可能是通过促进DC细胞的成熟、激活抗原呈递和共刺激分子表达来增强免疫反应的，而且这种佐剂的新城疫疫苗能给鸡提供100％的保护。这些结果表明了，LMS+佐剂可以增强新城疫灭活疫苗的免疫水平，尤其是细胞免疫水平。 随着疫苗技术的发展，DNA疫苗因其制备简单、且能同时诱导体液和细胞免疫反应等优点而备受瞩目。本研究利用新城疫病毒F48E9株的HN和F基因制备了新城疫的DNA疫苗，同时为提高DNA疫苗的免疫效果，本研究利用鸡的IFN-γ表达质粒为分子佐剂和左旋咪唑(LMS)为化学佐剂来加强新城疫DNA疫苗的免疫效果，并研究其对免疫效力(保护率)的影响。结果表明，与不使用佐剂的DNA疫苗相比，含有IFN-γ和LMS佐剂的DNA疫苗能显著增强体液和细胞免疫反应，表现在其能增强HI抗体水平和T细胞增殖能力，同时它们也能增强鸡整体的细胞因子，如IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-12和IL-13的表达，在致死剂量病毒攻击后，免疫后的鸡可以得到80％的保护，而单独DNA疫苗免疫的动物得不到保护。同时，通过实时定量PCR检测攻毒后存活动物体内的病毒含量还发现，以IFN-γ和LMS为佐剂与DNA疫苗免疫，在攻毒后鸡体内的病毒含量最低，这些结果证明IFN-γ和LMS作为佐剂不仅能协同增强新城疫DNA疫苗的保护率，同时也有助于降低病毒在体内复制。 免疫方式是影响DNA疫苗免疫效果的另一重要因素。本研究采用DNA疫苗初免，灭活病毒疫苗加强的方式，来增强DNA疫苗的免疫效果。结果表明，与DNA疫苗组相比，DNA疫苗和灭活病毒联合免疫组产生了更高的IgG、T细胞增殖和DTH反应水平；与灭活病毒疫苗组相比，联合免疫组在未降低体液免疫反应的前提下，显著地增强了细胞免疫水平。结果表明，这种联合免疫方式在一定程度上可以提高新城疫DNA疫苗的免疫效果。 总而言之，本研究证明了LMS+作为佐剂可以增强新城疫灭活疫苗的免疫效果，并为研究佐剂的作用机制提供了部分理论依据。同时，我们也制备了新城疫的DNA疫苗，并通过ChIFN-γ和LMS的协同作用增强了新城疫DNA的免疫水平和保护率。最后，采用DNA疫苗初疫，病毒灭活疫苗加强的方式增强了新城疫DNA疫苗的免疫效果。概括来说，本研究分别通过采用新型佐剂和不同的免疫方式增强了新城疫疫苗的免疫效果，为生产实践莫定了基础。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：插图和附表清单、缩略词表及实验主要仪器

独创性声明及关于论文使用授权的说明

第一篇文献综述

第二篇研究论文

第三篇结论与展望

附录

参考文献