表达H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白重组新城疫病毒的构建以及密码子优化的HA免疫增强作用

摘要

为构建表达H5N1亚型禽流感病毒(AIV) HA蛋白重组新城疫病毒(NDV)及比较密码子优化的HA免疫增强作用,本研究利用NDV LaSota弱毒疫苗株的反向遗传操作系统,分别构建了表达野毒型H5N1亚型AIVHA蛋白和密码子优化的HA蛋白的重组NDV,并分别命名为rL-H5HA和rL-optiH5HA.对拯救的重组病毒进行RT-PCR、间接免疫荧光和western blot鉴定,结果表明,两种重组病毒均可以在BHK-21细胞中以及鸡胚成纤维细胞稳定地表达HA蛋白.此外,rL-optiH5HA在体外增殖能力及在体内刺激产生抗体均显著高于rL-H5HA.本研究表明,密码子优化的HA重组NDV具有明显的免疫增强作用.本研究为研制安全、有效的新型禽流感疫苗提供了实验依据.