基于甲基葡萄糖醛酸钠诱导下大肠杆菌的光度法快速检测研究

摘要

建立了一种快速检测大肠杆菌的光度分析法.在脱氧胆酸钠(DOC)培养基中,大肠杆菌被甲基葡萄糖醛酸钠(methyl-β-D-glucuronide sodium,MetGlu)诱导,在细菌体内产生特异性葡萄糖醛酸酶(β-D-glucuronidase).通过膜渗透剂Polymyxin B nonapeptide hydrochloride (PBN) 和Lysozyme对大肠杆菌细胞膜的作用,葡萄糖醛酸酶从大肠杆菌细胞中释放出来.葡萄糖醛酸酶能够催化分解底物p-Nitrophenyl-β-D-glucuronide(PNPG)而产生对硝基酚,而对硝基酚的量与溶液中大肠杆菌的浓度成正比.对硝基酚对波长为400 nm的可见光有最大吸收.根据吸光度值的大小与对硝基酚的浓度成很好的线性关系,通过测定400 nm处对硝基酚的吸光度值,实现了对大肠杆菌的快速定量检测.