前B细胞克隆增强因子在肥胖大鼠 急性呼吸窘迫综合征中的表达研究

摘要

目的：探讨前B细胞克隆增强因子（PBEF）在肥胖大鼠急性呼吸窘迫综合征（ARDS）中的变化及其可能作用。方法将40只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、肥胖组、ARDS组和肥胖ARDS组，每组10只。肥胖两组大鼠采用高脂饲料喂养，另两组喂养普通饲料；待高脂饲养大鼠体重超过正常饲养大鼠20%时为肥胖模型建立成功。此时ARDS两组大鼠经尾静脉注射脂多糖（LPS）构建ARDS模型，另两组则注射等量生理盐水。于ARDS制模后8h开胸取肺组织，测定肺干/湿重（D/W）比值；采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测PBEFmRNA表达；用蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测PBEF、核转录因子-κBp50（NF-κBp50）蛋白表达；采用免疫组化法检测PBEF阳性表达；苏木素-伊红（HE）染色后光镜下观察肺组织病理学改变。结果高脂饲料喂养第6周成功建立肥胖大鼠模型。肥胖组、ARDS组、肥胖ARDS组肺D/W比值明显低于对照组（0.195±0.005、0.179±0.003、0.153±0.011比0.224±0.007，均P＜0.05），且肥胖ARDS组显著低于ARDS组，说明肥胖对非ARDS及ARDS大鼠的肺含水量均有影响。肥胖组、ARDS组、肥胖ARDS组肺组织PBEFmRNA表达量依次升高〔分别为对照组的（1.77±0.22）、（3.29±0.14）、（5.52±0.14）倍，均P＜0.01〕，肺组织PBEF、NF-κBp50蛋白表达量也依次升高〔PBEF分别为对照组的（1.75±0.16）、（2.71±0.19）、（3.83±0.18）倍，NF-κBp50分别为对照组的（1.56±0.12）、（1.95±0.12）、（2.48±0.24）倍，均P＜0.01〕，且各组间两两比较差异均有统计学意义。免疫组化显示，对照组肺组织中几乎无PBEF阳性表达；肥胖组有少量PBEF阳性表达；ARDS组PBEF阳性表达明显增多；肥胖ARDS组肺泡壁、肺泡腔内的渗出液中有强阳性反应。HE染色显示，对照组肺组织结构正常；肥胖组有少许炎性细胞浸润；ARDS组肺泡间隔增厚，肺泡腔内有大量红细胞浸润；肥胖ARDS组肺部炎症程度最为明显，肺泡腔内可见大量渗出液、红细胞及炎性细胞。结论 PBEF可能通过调控NF-κB的活性参与肥胖大鼠ARDS的发生发展。