DNA修复与四重PCR技术在植物标本PCR扩增中的应用研究

摘要

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术从其发明以来,因为其操作的简单方便和高效率而在生物学研究的各个领域得到了广泛应用,包括序列扩增、序列的人工突变、疾病诊断、法医学鉴定、基因的表达分析等.植物标本材料中的DNA是分子生物学研究领域的巨大资源,但是植物标本中由于储存时间长,DNA断裂等因素限制,目前其遗传信息的获取技术还不够完善,其中较低的序列获取率是利用标本馆标本为材料研究的首要问题.本研究通过对96个植物标本的DNA条形码片段进行DNA修复和四重PCR反应体系优化,从而实现植物DNA条形码片段的通量获取.本研究还通过优化PCR中taq酶、buffer、 引物和DNA模板的用量,改变扩增条件,获得了植物DNA条形码片段低偏四重PCR的实验结果,显著地提高了植物PCR扩增效果,可以为今后植物标本的遗传信息获取提供可靠方法.