多重PCR技术快速鉴定血培养阳性标本中酵母菌菌种的应用研究

摘要

目的:探讨多重PCR技术在快速鉴定引起真菌血症的重要医学酵母菌中的应用。方法:扩增酵母菌位于18SrRNA和5.8SrRNA基因之间的内转录间区(ITS)1的片段,以及白念珠菌位于ITS2区的特殊DNA片段,建立多重PCR方法,并鉴定血培养液中的酵母菌。结果:通过扩增片段长度分析显示光滑念珠菌482bp,季也蒙念珠菌248bp,近平滑念珠菌229bp,白念珠菌218bp和110bp,热带念珠菌219bp,新生隐球菌201bp,克柔念珠菌182bp。采用多重PCR方法共检测29例患者47份血培养阳性标本共50个分离株,其中白念珠菌27株,热带念珠菌8株,光滑念珠菌4株,近平滑念珠菌4株,新生隐球菌2株,克柔念珠菌1株,季也蒙念珠菌1株,均与培养鉴定结果一致,实验敏感性96%(47/50),特异性100%。多重PCR实验检测全过程共需8h。结论:多重PCR方法快速、敏感、特异,有助于播散性念珠菌感染的早期诊断,具有较好的应用前景。