DNA修复

摘要： DNA损伤修复(DNA damage repair,DDR)系统在维持“基因组稳定性”方面发挥重要作用。DNA损伤的累积及DDR功能减弱,都会促进肿瘤发生、发展,同时也给肿瘤的药物治疗提供机会和靶点。在肺癌治疗中,很多抗肿瘤药物发挥作用都与DNA损伤和修复密切相关。从导致DNA损伤的经典化疗药物、新型抗体偶联药物,到抑制DNA修复的靶向药物,以及免疫检查点抑制剂,这些药物在发挥抗肿瘤活性过程中,都直接或间接涉及DNA损伤及修复。本文综述了DNA损伤和修复在上述药物发挥抗肿瘤活性中的作用,并汇总了上述各类药物在肺癌治疗中的应用现状及临床探索,以期通过DNA损伤和修复为切入点,摸索更精准和有效的肺癌治疗策略。

摘要： 泛素—蛋白酶体系统(Ubiquitin-proteasome system,UPS)调节蛋白质的稳定性,在细胞内稳态中起着重要作用[1]。UPS参与许多生理过程,如细胞分化、凋亡、自噬、血管生成以及DNA修复和抗原提呈过程等[2-3]。泛素通过与不同的酶形成共轭级联复合物,进而与靶蛋白连接并启动特异性降解。泛素—蛋白酶体系统包括E1泛素激活酶、E2泛素活化酶和E3泛素连接酶[4]。

摘要： 目的:研究POLQ在肿瘤中的表达及对唾液腺腺样囊性癌细胞SACC-83增殖及克隆形成能力的影响,预测POLQ的表达调控因子。方法:应用数据库分析POLQ在肿瘤中的表达,并预测与POLQ启动子结合的FOXM1及二者的表达相关性。将体外培养的SACC-83细胞分为2组,用基因沉默技术(siRNA)抑制实验组细胞中POLQ的表达,未处理的细胞作为对照组。CCK-8实验检测增殖能力,平板克隆实验检测克隆形成能力,应用qRT-PCR检测基因表达水平。结果:数据库分析显示,多种肿瘤中POLQ表达高于正常组织。实验组细胞增殖能力及克隆形成能力均低于对照组(P<0.001,P<0.05)。FOXM1与POLQ启动子有5个结合位点,并与POLQ表达正相关(P<0.05)。PTEN下调促进SACC-83 POLQ与FOXM1表达(P<0.001,P<0.05)。结论:POLQ促进肿瘤的发生发展;促进SACC-83增殖及克隆形成能力;FOXM1可能正调控POLQ表达;PTEN负调控SACC-83 POLQ与FOXM1表达。

摘要： 紫外线是影响人类皮肤氧化的主要外部驱动器。紫外线轻者将会导致皮肤老化、银屑病、皮肤炎症和痤疮,严重将诱导皮肤癌症。长期暴露在阳光下,透过臭氧层的紫外线辐射能穿透不同深度的皮肤层,进而引起直接和间接的生物损伤反应,包括DNA损伤和活性氧诱导的氧化应激等。蓝光是可见光中波长最小、能量最大的波段,其诱导的皮肤损伤类似于紫外线辐射。益生菌具有抗氧化、抗衰老和抗炎特性,并且能够抵抗紫外线、蓝光诱导的氧化应激,从而可以用来保护皮肤免受光损伤,相应的功能性益生菌可成为抵抗紫外线、蓝光辐射诱导皮肤损伤的辅助食物。

摘要： 探讨习练太极拳对久坐少动老年人机体血浆8-OHdG和OGG1的影响,方法为对10名健康老年人进行为期16周(5次/周、70分钟/次)的简化太极拳练习干预。干预前(0周)、第8周、第12周及第16周于肘静脉采血3ml,并应用分光光度计和酶联免疫法测试血浆8-OHdG、OGG1及SOD等氧化应激指标。与干预前相比较,血浆8-OHdG在第8和第12周明显上升(P0.05);MDA从第8周起明显下降(P<0.05)。结论表明:16周太极拳练习可有效改善久坐老人DNA碱基的损伤及其修复能力,且从第8周开始便可获得这种效应。

摘要： 小细胞肺癌(SCLC)是高度恶性肿瘤,具有增殖速度快、早期转移及预后差的特点,5年生存率仅7.2%。DNA损伤应答(DDR)是机体在面对DNA损伤及复制应激时,通过激活细胞周期检查点、阻滞细胞周期来促进DNA损伤修复,避免未修复的DNA损伤诱导程序性死亡的过程。SCLC具有突变负荷高、基因组不稳定的特征,普遍存在p53及RB1功能失活,致使细胞周期G_(1)/S检查点缺陷,因而更加依赖后续的S、G_(2)/M检查点进行周期阻滞和DNA损伤修复以确保基因组的稳定性及染色体的正确分离。因此,在基于致DNA损伤的放化疗应用背景下,抑制周期检查点以促进周期进程、增加DNA损伤及抑制DNA损伤修复成为SCLC治疗的新策略。本文就靶向DDR及其通路关键分子(PARP、ATR、CHK1/2、WEE1、ATM、Aurora A)抑制剂在SCLC中的研究进展进行综述,以期为SCLC的治疗策略提供思考。

摘要： DNA的精确复制对维持基因组稳定性具有重要作用,而DNA双链断裂(DSB)损伤可能诱导细胞凋亡和染色质重排,在肿瘤的发生发展过程中发挥作用。DNA依赖性蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)是磷脂酰肌醇3-激酶样蛋白激酶(PIKK)家族中相对分子质量最大及表达量最高的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。与Ku70/80结合后,DNA-PKcs在离子辐射诱导DSB后的非同源末端连接(NHEJ)有效修复过程中,发挥非常重要的作用。DNA-PKcs或其他NHEJ修复因子的缺失会导致辐射敏感性和DSB的未修复,以及V(D)J重组缺陷和免疫缺陷。本文主要对DNA-PKcs的结构,在DSB位点的募集与激活,在NHEJ修复中的作用过程及其与疾病的关系进行总结与展望,希望能为DNA-PKcs的深入研究及临床应用提供理论基础。

摘要： [目的]克隆表达嗜热古菌Archaeoglobus fulgidus(A.fulgidus)来源的RecJ核酸酶基因(ORF编号AF_0699,NCBI数据库基因登陆号为AF_RS03550),对该重组蛋白的核酸酶活性及酶学特征进行鉴定和分析.[方法]将A.fulgidus RecJ(AfuRecJ)核酸酶在大肠杆菌中进行重组表达,经亲和层析纯化得到电泳纯蛋白;利用人工合成的带有末端荧光标记的寡核苷酸作为底物,体外反应后,利用8mol/L尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定AfuRecJ核酸酶的水解产物.[结果]AfuRecJ核酸酶具有单链DNA特异性的3'-5'外切核酸酶活性,酶活性依赖于二价金属离子Mn2+或Mg2+,且Mn2+存在条件下的催化效率明显优于Mg2+;其最适反应温度范围为55-65°C;高于200 mmol/L的NaCl会显著抑制AfuRecJ的核酸酶活性.AfuRecJ还具有单链RNA3'-5'外切酶活性,且活性高于单链DNA底物.单链核酸3'末端的磷酸基团对水解活性有一定抑制作用.AfuRecJ对单链核酸的长度有一定的选择性,可以有效水解长度≥4个核苷酸长度的单链RNA、≥12个核苷酸长度的单链DNA,而且对双链DNA中的3'单链DNA结构(3'突出单链尾巴与末端分叉结构)具有类似单链DNA的水解活性.[结论]本研究证实AfuRecJ是一种单链核酸特异性的3'-5'外切核酸酶,且相比单链DNA,单链RNA为优势底物,推测其在胞内可能参与RNA降解与DNA修复.

摘要： 目的 探讨鼻咽癌细胞HONE1中抑制DNA修复的潜在机制.方法 使用ETP处理鼻咽癌细胞HONE1造成DNA损伤后,通过高通量测序检测鼻咽癌细胞HONE1中miRNA的表达谱.过表达差异miRNA后,通过基于I-PpoI的可诱导DSB系统检测DNA双链断裂处(DNA double-strand breaks,DSB)的DNA-PKcs含量.通过miRDB在线分析miRNA的潜在靶标.通过荧光素酶报告系统检测miRNA靶向mRNA.结果 ETP处理后hsa-miR-9983-3p、hsa-miR-4731-5p、hsa-miR-3675-5p、hsa-miR-516b-5p、hsa-miR-4437、hsa-miR-7114-5p、hsa-miR-637、hsa-miR-5008-5p的表达水平上升至少8倍.miR-516b-5p mimics导致DSB的DNA-PKcs含量减少(P<0.05),而miR-516b-5p inhibitor导致DSB的DNA-PKcs含量增加(P<0.05).在鼻咽癌细胞HONE1中过表达miR-516b-5p后,ATM mRNA的表达水平和蛋白表达水平下降,DNA-PKcs的磷酸化水平下降;而抑制miR-516b-5p表达后,ATM mRNA的表达水平和蛋白表达水平上升,DNA-PKcs的磷酸化水平上升.同时,miR-516b-5p靶向ATM的3端非编码区.过表达ATM后,DSB的DNA-PKcs含量上升(P<0.05),而敲低ATM后,DSB的DNA-PKcs含量下降(P<0.05).结论 miR-516b-5p通过靶向ATM mRNA的3端非编码区,降解了ATM mRNA,抑制了ATM的翻译,随后DNA-PKcs的磷酸化水平下降,DNA-PKcs与DSB的结合减少,最终抑制了鼻咽癌细胞HONE1的DNA修复.

摘要： 糖尿病是以慢性高血糖为特征的一组疾病综合征,可导致一系列微血管及大血管并发症,易累及心血管、神经、视网膜、肾等.长期高糖环境常引发细胞氧化应激及活性氧类(ROS)生成,导致细胞核DNA损伤.ROS引发DNA链断裂后,DNA修复酶过度激活,进一步引起细胞慢性炎症、胰岛素抵抗等,加剧细胞代谢紊乱,引发糖尿病并发症.因此,深入了解DNA损伤修复过程与糖尿病及其并发症的关系,对寻找有效的糖尿病早期预防靶点有积极意义.

摘要： 利用研制的毛细管电泳-激光诱导荧光偏振装置发现RecA通过ATP水解在ssDNA上组装形成具有活性的低密度、不饱和的核蛋白丝组装体,其能在体外介导链交换反应和活体内同源重组,提出一种RecA结合DNA-依赖ATP酶水解活性重塑核蛋白丝形成不饱和的核蛋白丝介导同源重组的新模型.

摘要： 利用研制的毛细管电泳-激光诱导荧光偏振装置发现RecA通过ATP水解在ssDNA上组装形成具有活性的低密度、不饱和的核蛋白丝组装体,其能在体外介导链交换反应和活体内同源重组,提出一种RecA结合DNA-依赖ATP酶水解活性重塑核蛋白丝形成不饱和的核蛋白丝介导同源重组的新模型.

摘要： 利用研制的毛细管电泳-激光诱导荧光偏振装置发现RecA通过ATP水解在ssDNA上组装形成具有活性的低密度、不饱和的核蛋白丝组装体,其能在体外介导链交换反应和活体内同源重组,提出一种RecA结合DNA-依赖ATP酶水解活性重塑核蛋白丝形成不饱和的核蛋白丝介导同源重组的新模型.

摘要： 利用研制的毛细管电泳-激光诱导荧光偏振装置发现RecA通过ATP水解在ssDNA上组装形成具有活性的低密度、不饱和的核蛋白丝组装体,其能在体外介导链交换反应和活体内同源重组,提出一种RecA结合DNA-依赖ATP酶水解活性重塑核蛋白丝形成不饱和的核蛋白丝介导同源重组的新模型.

摘要： 利用研制的毛细管电泳-激光诱导荧光偏振装置发现RecA通过ATP水解在ssDNA上组装形成具有活性的低密度、不饱和的核蛋白丝组装体,其能在体外介导链交换反应和活体内同源重组,提出一种RecA结合DNA-依赖ATP酶水解活性重塑核蛋白丝形成不饱和的核蛋白丝介导同源重组的新模型.

摘要： 利用研制的毛细管电泳-激光诱导荧光偏振装置发现RecA通过ATP水解在ssDNA上组装形成具有活性的低密度、不饱和的核蛋白丝组装体,其能在体外介导链交换反应和活体内同源重组,提出一种RecA结合DNA-依赖ATP酶水解活性重塑核蛋白丝形成不饱和的核蛋白丝介导同源重组的新模型.

摘要： 四十多年前由美国总统尼克松发起《向癌开战计划》以来,癌死亡率沒有明显下降.失败原因之一是化疗和放疗都通过加剧DNA损伤来杀癌,但敌我不分,滥杀正常细胞,毒副反应严重甚至致命.失败原因之二是目前的治疗主要集中在癌的中晚期,完全忽视癌前防治.面对传统疗法的失败,必须进行战略性转变.第一种转变是从杀死癌细胞到改造癌细胞的转变,即从加剧DNA损伤向加强DNA修复的转变.DNA的快速修复削弱了癌的特征性标志,使癌变逆转.据此,提出了全程保护DNA的新抗癌学说.第二种转变是抗癌的对象从癌细胞转变到癌干细胞,即阻断或降低癌干细胞的DNA修复能力.有趣的是利用DNA修复的相反作用达到抗癌的同一目的.

摘要： 四十多年前由美国总统尼克松发起《向癌开战计划》以来,癌死亡率沒有明显下降.失败原因之一是化疗和放疗都通过加剧DNA损伤来杀癌,但敌我不分,滥杀正常细胞,毒副反应严重甚至致命.失败原因之二是目前的治疗主要集中在癌的中晚期,完全忽视癌前防治.面对传统疗法的失败,必须进行战略性转变.第一种转变是从杀死癌细胞到改造癌细胞的转变,即从加剧DNA损伤向加强DNA修复的转变.DNA的快速修复削弱了癌的特征性标志,使癌变逆转.据此,提出了全程保护DNA的新抗癌学说.第二种转变是抗癌的对象从癌细胞转变到癌干细胞,即阻断或降低癌干细胞的DNA修复能力.有趣的是利用DNA修复的相反作用达到抗癌的同一目的.

摘要： 四十多年前由美国总统尼克松发起《向癌开战计划》以来,癌死亡率沒有明显下降.失败原因之一是化疗和放疗都通过加剧DNA损伤来杀癌,但敌我不分,滥杀正常细胞,毒副反应严重甚至致命.失败原因之二是目前的治疗主要集中在癌的中晚期,完全忽视癌前防治.面对传统疗法的失败,必须进行战略性转变.第一种转变是从杀死癌细胞到改造癌细胞的转变,即从加剧DNA损伤向加强DNA修复的转变.DNA的快速修复削弱了癌的特征性标志,使癌变逆转.据此,提出了全程保护DNA的新抗癌学说.第二种转变是抗癌的对象从癌细胞转变到癌干细胞,即阻断或降低癌干细胞的DNA修复能力.有趣的是利用DNA修复的相反作用达到抗癌的同一目的.

摘要： 四十多年前由美国总统尼克松发起《向癌开战计划》以来,癌死亡率沒有明显下降.失败原因之一是化疗和放疗都通过加剧DNA损伤来杀癌,但敌我不分,滥杀正常细胞,毒副反应严重甚至致命.失败原因之二是目前的治疗主要集中在癌的中晚期,完全忽视癌前防治.面对传统疗法的失败,必须进行战略性转变.第一种转变是从杀死癌细胞到改造癌细胞的转变,即从加剧DNA损伤向加强DNA修复的转变.DNA的快速修复削弱了癌的特征性标志,使癌变逆转.据此,提出了全程保护DNA的新抗癌学说.第二种转变是抗癌的对象从癌细胞转变到癌干细胞,即阻断或降低癌干细胞的DNA修复能力.有趣的是利用DNA修复的相反作用达到抗癌的同一目的.

摘要： 本发明涉及一种经改进，用少于50ng样品DNA检测和定量分析大片段双链DNA模板中DNA损伤的方法。本发明可用于在病人体内定量基因特异性的DNA损伤，测定DNA修复速度，以及监测抗癌治疗的效果。此外，本发明还可以用于检测和评价由诱变性环境危险场所造成的风险性，以及监测危险性场所的动力学，本发明还包括一用于实现上述目的的设备。

摘要： 本发明提供了一种DNA损伤修复体系、DNA文库构建试剂盒及文库构建方法。该DNA损伤修复体系包括DNA损伤修复酶，DNA损伤修复酶为UDG。通过利用上述含有UDG的DNA损伤修复体系，在文库构建前先对损伤进行修复，对修复后的DNA进行文库构建，能够增加部分文库的转化，满足杂交捕获的用量，并且能够提高所构建得到的文库的质量，提高目的片段的测序深度，降低产出数据中的重复序列，从而提高检测准确性，降低上机成本。

摘要： 提供渗透细胞核并抑制DNA修复或干扰DNA代谢的抗体用于治疗癌症（直接地以及通过使癌细胞对DNA损伤型治疗敏感）或者抑制或预防病毒感染、增殖或代谢。所述方法涉及用含有细胞渗透型抗DNA抗体或其衍生物的组合物处理细胞，单独或与诱导DNA损伤的治疗（例如DNA损伤型化学疗法或放射）组合。细胞渗透型抗DNA抗体或其衍生物的影响在DNA修复不足的癌细胞中得到增强，并且细胞渗透型抗DNA抗体或其衍生物对DNA修复不足的癌细胞具有合成致死性。

摘要： 一种固定超螺旋DNA的方法，包括在多孔聚合物膜表面上沉积超螺旋DNA样品，通过被动扩散将超螺旋DNA固定在其中，利用本发明方法获得载体，和使用该载体分析DNA分布。

摘要： 本发明涉及一种经改进,用少于50ng样品DNA检测和定量分析大片段双链DNA模板中DNA损伤的方法。本发明可用于在病人体内定量基因特异性的DNA损伤,测定DNA修复速度,以及监测抗癌治疗的效果。此外,本发明还可以用于检测和评价由诱变性环境危险场所造成的风险性,以及监测危险性场所的动力学,本发明还包括一用于实现上述目的的设备。

摘要： 本发明提供了一种DNA损伤修复体系、DNA文库构建试剂盒及文库构建方法。该DNA损伤修复体系包括DNA损伤修复酶，DNA损伤修复酶为UDG。通过利用上述含有UDG的DNA损伤修复体系，在文库构建前先对损伤进行修复，对修复后的DNA进行文库构建，能够增加部分文库的转化，满足杂交捕获的用量，并且能够提高所构建得到的文库的质量，提高目的片段的测序深度，降低产出数据中的重复序列，从而提高检测准确性，降低上机成本。

摘要： 提供了真核细胞的内源性靶标DNA的位点特异性修饰的方法。该方法包括使具有预定修饰位点的内源性靶标DNA与(i)基因编辑系统和(ii)包含多个串联重复序列的供体DNA修复模板接触，所述基因编辑系统被配置为在预定修饰位点或其附近引入内源性靶标DNA的双链断裂。在该方法中，所述多个串联重复序列中的每一个包含由供体5′侧翼序列和供体3′侧翼序列侧接的外源性供体DNA序列。供体5′侧翼序列和供体3′侧翼序列与内源性靶标DNA中的预定修饰位点的任一侧上的连续DNA序列同源。

摘要： 本发明涉及制备治疗包虫病药物技术领域，是一种致DNA损伤化合物联合DNA损伤修复抑制剂的组合物及制备方法和应用，前者包括致DNA损伤化合物和DNA损伤修复抑制剂，致DNA损伤化合物为去氢骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱衍生物、阿霉素、放线霉素D、道诺梅素、依托泊苷和替尼泊苷中的一种以上，DNA损伤修复抑制剂为RAD51抑制剂和BRCA1抑制剂中的一种以上。本发明通过联合使用致DNA损伤化合物和DNA损伤修复抑制剂，用于治疗包虫病，可实现致DNA损伤化合物对虫体DNA损伤的同时，DNA损伤修复抑制剂实现DNA损伤修复的抑制，完全阻断虫体的DNA损伤修复过程，最终导致虫体凋亡，发挥抗包虫作用，提高了抗包虫的治疗效果。

摘要： 提供渗透细胞核并抑制DNA修复或干扰DNA代谢的抗体用于治疗癌症（直接地以及通过使癌细胞对DNA损伤型治疗敏感）或者抑制或预防病毒感染、增殖或代谢。所述方法涉及用含有细胞渗透型抗DNA抗体或其衍生物的组合物处理细胞，单独或与诱导DNA损伤的治疗（例如DNA损伤型化学疗法或放射）组合。细胞渗透型抗DNA抗体或其衍生物的影响在DNA修复不足的癌细胞中得到增强，并且细胞渗透型抗DNA抗体或其衍生物对DNA修复不足的癌细胞具有合成致死性。

摘要： 一种固定超螺旋DNA的方法，包括在多孔聚合物膜表面上沉积超螺旋DNA样品，通过被动扩散将超螺旋DNA固定在其中，利用本发明方法获得载体，和使用该载体分析DNA分布。