运动预适应通过间歇性缺血缺氧诱导细胞自噬参与早期心肌保护的研究

摘要

目的:通过分析运动性心肌缺血缺氧与细胞自噬的关系,检测自噬相关蛋白Beclin1/Bcl-2在早期运动预适应(EEP)及保护期的变化,探讨细胞自噬在EEP心肌保护效应中的作用.方法:SD大鼠随机分为对照组(C组)、早期运动预适应组(EEP组)、力竭运动组(EE组)和早期运动预适应+力竭运动组(EEP+EE组).1)用化学发光免疫分析法(CLIA)检测血浆cTnI含量,结合HE和HBFP相邻切片染色,综合评价心肌缺血缺氧的程度,验证EEP心肌保护效应.2)用免疫印迹和免疫荧光双标法检测并观察Beclin1/Bcl-2的表达变化和解离程度.3)通过相关性分析评估运动性缺血缺氧与细胞自噬的关系.结果:1)与C组相比,EEP组血浆cTnI水平和MOD值均具有升高的趋势(P>0.05),且EE组和EEP+EE组升高具有显著性(P<0.05);与EE组相比,EEP+EE组cTnI水平和MOD值显著降低(P<0.05);与C组相比,其余各组心肌组织均显示不同程度的缺血缺氧改变,HE染色嗜酸性增强部位与HBFP染色艳红色阳性区域趋近一致.2)与C组相比,其余各组Beclin1均显著升高(P<0.05),Beclin1/Bcl-2解离程度增加(P<0.05),而Bcl-2并无明显变化;与EE组相比,EEP+EE组Beclin1/Bcl-2共定位程度显著升高(P<0.05).3)各组IHA和IOD值均与Beclin1/Bcl-2共定位程度呈显著负相关(P<0.05).结论:EP通过间歇性缺血缺氧可以诱导心肌细胞自噬,细胞自噬参与了EP对运动性心肌损伤的早期保护效应.