荧光PCR熔解曲线法在结核分枝杆菌耐药基因检测中的应用

摘要

目的 探讨气管镜刷检物实时荧光PCR熔解曲线耐药法检测对复治结核病耐药早期诊断的价值,同时根据支气管刷检深部痰液结核菌耐药检测结果,进一步分析指导可疑耐药结核病治疗,规范临床合理用药,为耐药结核病的诊断及治疗提供科学依据.方法 纳入160例结核分枝杆菌(MTB)患者为本研究对象.每例患者采用同一标本进行绝对浓度法和熔解曲线法耐药基因检测,观察熔解曲线法对利福平、异烟肼的检测敏感度、特异度、准确度.结果 同一标本应用两种方法检测时,绝对浓度法检出利福平21例耐药,139例敏感;检出异烟肼68例耐药,92例敏感.熔解曲线法检出利福平17例耐药,139例敏感,4例未检出结果;检出异烟肼61例耐药,99例敏感.熔解曲线法对利福平的检测准确度为96.15％、敏感度为87.50％、特异度为98.39％;对异烟腓的检测准确度为95.00％、敏感度为88.57％、特异度为96.80％.两种检验方法对利福平及异烟肼的耐药及敏感率比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 荧光PCR熔解曲线法能够快速检测出MTB对药物的耐药基因检测,而且有良好的敏感度和特异度,有效节约时间、安全高效,是临床检验及诊治耐药结核的有效手段.