RNA干扰Fbxw8基因对人结肠癌细胞增殖能力的影响

摘要

目的 探讨靶向抑制Fbxw8基因对结肠癌SW480细胞增殖的影响.方法 RNA干扰(RNAi)方法下调SW480细胞中Fbxw8的表达.通过Real-time PCR、western blotting方法分别检测Fbxw8 mRNA和蛋白表达变化;CCK-8、细胞克隆形成实验及BrdU掺入法检测下调Fbxw8对SW480细胞的增殖、DNA合成能力的影响.Western blotting检测下调Fbxw8对SW480细胞增殖相关基因表达的影响.结果 Fbxw8 siRNAs显著降低SW480细胞Fbxw8mRNA和蛋白的表达,CCK-8结果显示:与对照组(0.78±0.11)相比,两对Fbxw8 siRNAs均可显著抑制细胞的生长(0.46±0.07、0.49±0.03,P＜0.05);细胞克隆形成实验显示与对照组相比,Fbxw8 siRNAs组细胞的克隆形成数目及大小显著降低.BrdU掺入实验显示与对照组(0.83±0.12)相比,Fbxw8 siRNAs均能显著下调DNA的合成能力(0.47±0.06、0.56±0.09,P＜0.05);同时伴随着细胞周期蛋白cyclin E的下调而p27的表达升高.结论 Fbxw8 siRNA可以通过下调cyclin E、上调p27的表达而有效抑制SW480细胞增殖,为结肠癌的基因治疗提供新的候选靶点.