RNA干扰IDH2基因对HCT-8细胞增殖能力的影响

摘要

目的:研究RNA干扰(RNAi)对结肠癌HCT-8细胞IDH2基因表达的抑制作用及干扰后对HCT-8细胞增殖的影响,为结肠癌的基因靶向治疗提供理论依据.方法:实验分siRNA干扰质粒转染组、阴性质粒对照组和HC-8细胞空白对照组.构建靶向基因IDH2的siRNA真核绿色荧光载体重组质粒PGPU6/GFP/NeoIDH2,利用FuGENE HD转染剂转染HCT-8细胞,通过荧光定量PCR检测IDH2 mRNA的表达情况及MTT法检测结肠癌HCT-8细胞增殖变化.结果:在荧光显微镜下进行细胞计数,细胞转染率为74％.实时荧光定量PCR检测,siRNA重组质粒PGPU6/GFP/Neo-IDH2对IDH2基因表达的抑制率为85.02％,与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).MTT检测,干扰质粒转染组细胞的增殖能力明显低于空白对照组(P＜0.05).结论:抑制IDH2基因的表达可影响结肠癌细胞的增殖能力,提示IDH2基因在结肠癌的发生发展中起重要作用,抑制IDH2基因的表达可能成为一种治疗结肠癌的方法.