双水相萃取法提取紫花油豆中凝集素

摘要

本文建立了一种从紫花油豆中快速高效分离凝集素的方法,采用PEG-盐双水相体系进行分离,以上相蛋白得率和纯化倍数作为评价指标,分别考察了(NH4)2SO4质量分数、PEG600质量分数和体系pH值三种显著单因素,同时用SDS-PAGE电泳对其进行检测,探究凝集素在PEG600/(NH4)2SO4双水相体系中的分配规律.结果表明:双水相体系分离凝集素的最优条件为(体系共5mL):3mL25%(w/w)的(NH4)2SO4溶液、1mL 90%(w/w)的PEG600溶液、1mL的粗蛋白提取液、调pH值为7.5,此时上相蛋白得率为42.32%,纯化倍数为3.08.