间接ELISA检测鸭疫里默氏杆菌血清抗体方法的建立

摘要

应用1型鸭疫里默氏杆菌(云南株)超声粉碎物作为包被抗原,建立检测鸭疫里默氏杆菌血清抗体的间接ELISA方法.用倍比稀释法确定HRP标记羊抗鸭二抗最佳稀释倍数为1:3500,并用棋盘测定法确定抗原的最佳包被浓度为2.7mg/mL,血清最佳稀释倍数为1:300,阴性血清临界值为0.381;阻断试验结果表明,1型鸭疫里默氏杆菌与其抗血清阻断阳性,与鸭大肠杆菌078、0132菌株和FJ4型鸭疫里默氏杆菌阻断阴性(无交叉反应).重复性试验结果表明,该ELISA方法批内变异系数≤0.246,批间变易系数≤0,889.结果表明,该ELISA方法特异性强,重复性好,可用于1型鸭疫里默氏杆菌(云南株)血清抗体的检测.