鸭疫里默氏杆菌

摘要： 鸭疫里默氏杆菌病是由鸭疫里默氏杆菌引起的一种接触性传染性疾病,具有发病率高、死亡率高的特点,会给养鸭业带来严重的经济损失。为了有效防治鸭疫里默氏杆菌病,养殖人员和兽医需要了解其流行情况、病原、血清型、耐药性等,结合疫病发生情况采取防治措施。

摘要： 鸭疫里氏杆菌病又称鸭传染性浆膜炎,是由鸭疫里氏杆菌引起的主要侵害雏鸭的一种急性败血性传染病。近几年,该病的发病率和死亡率不断升高,迄今为止还主要靠药物治疗。了解鸭疫里氏杆菌的耐药机制及其快速准确检测,其污染是控制鸭疫里默氏杆菌感染传播及其疾病治疗的关键环节。因此本文对鸭疫里氏杆菌的耐药现状、耐药机制以及分子生物学检测方法做了总结概述,以期为临床合理用药防治鸭疫里氏杆菌病,减缓耐药菌株的产生提供依据。

摘要： 为建立鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,以RA贵州分离株RAG06基因组为模板扩增并克隆鸭疫里默氏杆菌OmpA基因,构建pET32a-OmpA重组原核表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,重组菌经诱导、超声、纯化后,通过SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定获得OmpA重组蛋白大小约57 KD;以OmpA重组蛋白为包被抗原初步建立ELISA方法并优化,经多次方阵检测结果显示,OmpA蛋白以2.243 mg/mL的浓度进行包被,血清以1∶100稀释,抗原包被条件为4°C过夜、封闭条件为37°C120 min、血清反应时间为37°C60 min、酶标抗体工作浓度为1∶1000、酶标抗体反应时间为37°C60 min、显色时间为15 min为最佳条件。确定临界值为0.389。特异性试验表明RA阳性血清有较好反应外,其他血清均无明显反应。批内变异系数2.77%~8.00%,批间变异系数为1.10%~7.80%。当阳性血清稀释比例为1∶1600时,仍可判断为阳性,敏感性较高。应用该方法检测贵州省120份鸭血清、65份鹅血清证明该方法能用于水禽源鸭疫里默氏杆菌的检测,应用该方法检测灭活疫苗免疫后的鸭血清和卵黄抗体,结果表明符合灭活疫苗消长规律。试验建立的ELISA方法,为RA的流行病学调查和RA抗体监测提供了血清学诊断方法。

摘要： 问:小鹅浆膜炎该怎样防治?答:鹅传染性浆膜炎是由鸭疫里默氏杆菌引起的一种接触性传染病,患病鹅以纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎、输卵管炎、关节炎、脑膜炎等为特征性病变。本病治疗可在饲料中添加强力霉素和在水中加氟苯尼考进行群体防治,个体病鹅可用氨苄青加庆大霉素注射。

摘要： 本试验对不同地区分离的3株血清6型鸭疫里默氏杆菌,通过摇瓶试验筛选出血清6型鸭疫里默氏杆菌适宜的增菌液体培养基和细菌计数培养基,通过5 L发酵罐各菌株生长曲线的对比,筛选出适合工业化发酵的菌株以及发酵工艺参数,通过鸭疫里默氏杆菌疾病模型条件筛选确立了攻毒模型。结果显示:WF201910株和TA201912株适宜的增菌液体培养基为商品化的RA培养基,LY202001株适宜的增菌液体培养基为商品化的TSB培养基,三个菌株适宜的细菌计数培养基均为TSA培养基;5L发酵罐发酵TA201912株在RA液体培养基最高菌数可以达到3.28×10;CFU/mL,通过500L发酵罐放大工艺验证,该工艺参数适合于规模化生产;4周龄雏鸭腿部肌肉注射鸭疫里默氏杆菌3 d后开始发病,发病与死亡高峰期为攻毒后3~6 d,临床症状与病原学鉴定均符合血清6型鸭疫里默氏杆菌疾病。本试验为血清6型鸭疫里默氏杆菌灭活疫苗的研制打下了基础。

摘要： 【目的】明确广东地区鸭疫里默杆菌Riemerella anatipestifer的血清型、耐药状况及遗传进化关系。【方法】从规模化鸭场分离鉴定鸭疫里默氏杆菌,通过玻片凝集试验鉴定血清型;利用试管两倍稀释法测试抗菌药物的最低抑菌浓度,分析药物的敏感性;采用全基因组测序技术分析序列特征并构建核心基因组遗传进化树。【结果】共分离鉴定鸭疫里默氏杆菌168株,血清1、2、3、5、6、7、8、10型均有流行,血清1型的菌株高达54.17%(91/168),其次为2型,占27.97%(47/168)。48株代表性菌株对庆大霉素、卡那霉素、盐酸环丙沙星表现高度耐药,耐药率均超过80%;对土霉素、盐酸四环素、盐酸金霉素、氧氟沙星、诺氟沙星、磺胺二甲嘧啶、磺胺对甲氧嘧啶的耐药率均在60%以上;对阿莫西林、头孢噻肟和大观霉素的耐药率低于30%。受试菌株对5~12种药物耐药,共有44种耐药谱型。成功获得46株菌株全基因组序列,共检出6种耐药基因,其中,耐药基因erm(F)和tet(X)的检出率较高,分别为73.91%(34/46)和82.60%(38/46),同时携带2种以上耐药基因的菌株占95.65%(44/46)。18株(39.13%,18/46)菌株ST分型成功,分属11个ST型。所有测序菌株与数据库中来自中国的菌株在遗传进化关系上最接近,主要存在于优势克隆群系Clade 1和Clade 3中。【结论】本研究鸭疫里默氏杆菌分离株的优势血清型为1型,耐药性严重,所携带的耐药基因与耐药表型具有一定相关性,ST型呈多样性,与多位点序列分型(Multi-locus sequence typing,MLST)数据库中来自我国菌株的遗传背景相近。研究结果可为鸭疫里默氏杆菌病疫苗免疫预防与药物治疗提供依据,有助于掌握鸭疫里默氏杆菌遗传进化特征。

摘要： 为对河北省张家口赤城县某肉鹅养殖场的雏鹅死亡病原进行检测,剖检雏鹅进行初步诊断后采用常规方法分离细菌病原,并对分离菌进行鉴定试验以及药物敏感性试验。结果表明,分离菌经鉴定为鸭疫里默氏杆菌,对雏鹅具有较强致病性,分离菌对庆大霉素、卡那霉素和大观霉素等8种抗生素表现耐药,仅对阿莫西林表现敏感。

摘要： 【目的】制备鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)贵州流行株蜂胶灭活疫苗。【方法】选取RA血清2型贵州流行株(RA-SS-8株)为基础菌株,依次利用分光光度法和平板计数法测定细菌生长曲线,再进行灭活条件筛选,以蜂胶为佐剂制备RA贵州流行株蜂胶灭活疫苗,并进行无菌检验、安全性检验及免疫鸭攻毒保护性试验。【结果】分光光度法测定RA-SS-8株菌液D_(600 nm)值随培养时间变化显示,细菌在0~3 h时增殖缓慢,在3~10 h时增殖趋势明显加快,在10 h以后增殖逐渐趋于平缓,随着培养时间的延长,细菌最终进入衰亡期;平板计数法结果显示,RA-SS-8株D_(600 nm)值为0.1~0.8时,该菌处于对数生长期,且D_(600 nm)值与活菌数呈现良好的线性关系;RA-SS-8株最佳灭活条件为0.2%甲醛溶液、37°C灭活12 h;蜂胶灭活疫苗含菌量为3.810^(9)CFU/mL,蜂胶干物质含量为10 mg/mL;无菌检验巧克力琼脂培养基上未见菌落生长;安全性检验以2倍免疫剂量接种雏鸭在观察期内未表现出不良反应,大体病变观察未见明显病变;免疫鸭攻毒保护性试验显示,蜂胶灭活疫苗免疫组鸭对RA-SS-8株的攻击后保护率为70%,蜂胶灭活疫苗对试验鸭心脏、肝脏组织均具有良好的保护效果。【结论】本研究成功制备了RA贵州流行株蜂胶灭活疫苗,为蜂胶灭活疫苗制备和动物免疫试验奠定基础。

摘要： 为摸清商丘市鸭疫里默氏杆菌(RA)的流行特性,为临床用药提供建议,本试验从商丘市养鸭场疑似感染RA的病鸭分离出6株病原菌,经细菌分离培养特性观察、生化试验和PCR检测,确诊为RA感染,血清型鉴定为血清1型2株,血清2型3株,未定血清型1株。常规抗菌药物的耐药性试验结果显示,6株分离菌对羧苄西林、氨苄西林、庆大霉素、链霉素、多西环素、头孢氨苄6种药物高度耐药,耐药率均大于80%,对复方新诺明、丁胺卡那、卡那霉素、氟苯尼考、诺氟沙星、恩诺沙星、阿莫西林7种药物高度敏感。动物回归试验结果显示,病死鸭表现典型的鸭疫里默氏杆菌病临床症状。本试验为商丘市鸭疫里默氏杆菌病的防控提供了参考依据。

摘要： 鸭疫里默氏杆菌(RA)为一种可引起鸭、鹅、鸡、火鸡等禽类急性或慢性败血症的革兰氏阴性菌,是鸭场重要病原菌之一。本研究利用鸭疫里默氏杆菌三重PCR鉴定方法,从养殖场病鸭的脏器中分离、鉴定出一株鸭疫里默氏杆菌,将其命名为RAWH9;通过血清型鉴定实验和Kirby-Bauer药敏实验,确定了其血清型和药敏性;利用细菌基因组三代测序技术和生物信息学平台,我们构建并分析了RA-WH9基因组完成图。结果表明,RA-WH9为1型血清型鸭疫里默氏杆菌,对氨苄西林、多粘菌素B和利福平等抗生素耐药,其对利福平最小抑菌浓度达到50μg/mL。全基因组序列分析表明,RA-WH9染色体总长度为2488018 bp,GC含量34.58%,编码2563个基因,其中包含88个耐药基因,其耐药基因型与耐药表型一致。此外,RA-WH9携带一个全长10736 bp的质粒。本研究丰富了鸭疫里默氏杆菌的基因库,为鸭疫里默氏杆菌病的防控提供了依据。

摘要： 本研究对血清1型鸭疫里默氏杆菌CH3株的ompA/motb基因核苷酸序列及其蛋白进行生物学信息分析后,用PCR技术扩增获得去除信号肽编码区段的ompA/motb基因,并构建重组表达质粒pET30a-OmpA/mtob,成功表达分子量约为55kDa的重组蛋白rOmpA/motb.rOmpA/motb能与血清1、2、10和15型RA阳性血清发生特异性反应,表明OmpA/motb具有交叉免疫原性.以纯化的rOmpA/motb免疫新西兰大白兔,经三次免疫后兔血清中抗OmpA/motb蛋白的抗体效价为1:256,000;Western blot结果显示OmpA/motb兔多抗可与血清1型、2型、10型和15型RA菌株发生特异性结合反应,与其他菌株无反应性.本研究制备的RA OmpA/motb多克隆抗体具有良好的反应性及特异性,为进一步研究OmpA/motb蛋白的免疫学功能及建立鸭疫里默氏杆菌病的诊断方法奠定了基础.

摘要： 2014年11月,贵州省三穗县某三穗鸭养殖基地饲养的5000只三穗鸭雏鸭,6周龄时突然发病,一周内死亡800只左右,死亡率近16％.文章综合临床调查、病理剖检和实验室检测,确诊为新城疫病毒和鸭疫里默氏杆菌混合感染，并介绍了及时消毒、免疫接种和抗生素治疗等方法,使病情得到了有效控制.

摘要： 从贵州地区临床疑似鸭传染性浆膜炎发病鸭鹅中分离病原菌,经细菌分离培养、细菌形态、培养特征及生化试验,初步鉴定出疑似鸭疫里默氏杆菌20株,经PCR和动物接种试验,其中9株鉴定为鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA).对不同地区分离到的这9株菌进行血清型鉴定和15种常规抗菌药物的药敏试验。该9株RA中4株为血清2型,其余5株暂未鉴定出血清型;9株分离株中,对吡哌酸、链霉素、卡那霉素和红霉素等耐药的菌株比例为80％以上,仅对先锋霉素的高度敏感菌比例较高。结果表明本次分离RA菌株生化试验鉴定结果与其他地区存在一定差异;不同地区分离到的鸭疫里默氏杆菌对不同抗菌药的敏感程度存在较大差异性,研究结果为该地区鸭传染性浆膜炎的药物防制提供了很好的理论依据。

摘要： 鸭疫里默氏杆菌(RA)病是目前危害养鸭业的主要传染病之一,应用灭活疫苗控制本病为主要的防控手段.本文将对一株易于培养的血清2型RA的致病力进行测定,并应用其制备灭活疫苗观察其免疫效果,为该病的防控提供疫苗候选株.选用本实验室分离鉴定的一株易于培养的血清2型RA,复苏后,选取15天龄非免疫北京白鸭肌肉注射该株细菌进行攻毒试验测定其致病力，结果显示应用该株血清2型RA制备的油乳剂灭活疫苗，无论是0.25mL还是0.5mL免疫剂量组，均能对鸭子提供80%以上的保护率.

摘要： 鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)是临床上引起鸭传染性浆膜炎的主要病原，感染后的发病鸭常常继发大肠杆菌、沙门氏菌等其他病原微生物的感染。为了研究RA中由钝化酶介导的氨基糖苷类药物耐药基因的分布情况，本文采用PCR方法对2005-2010年临庆分离到38株的RA进行了ant(3")-Ia,aac(6')-Ib和aph (3')-IIa三种氨基糖苷类钝化酶基因的检测。结果表明:ant(3")-Ia,aac(6')-Ib和aph(3')-IIa三种氨基糖苷类钝化酶基因在本实验室临床分离的38株RA中已普遍存在，且多重耐药现象比较严重。因此我们推测，RA与大肠杆菌和沙门氏菌等其它菌属的细菌之间可能发生了耐药基因的水平转移，这种转移机制有待于更深入的研究。

摘要： 为解析鸭疫里默氏杆菌生物被膜形成的分子机制将有助于在生物被膜形成过程的不同环节寻找合适的药物作用靶标来抑制生物被膜的形成或破坏已形成的生物被膜。本文利用转座子随机突变技术构建了鸭疫里默氏杆菌强形成生物被膜CH3株的Tn4351转座子突变库，从2520株突变株中筛选到了39株生物被膜形成减少的突变株。转座子插人突变株的生物被膜形成图片表明，基因的缺失可能导致生物被膜形成停留在某一阶段而阻止生物被膜最终的形成。

摘要： 鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer，RA)是一种主要侵害2～7周龄雏鸭的革兰氏阴性致病菌。Riemer等首次报道鹅因感染该菌而发病，并将其命名为“鹅渗出性败血症”;Dougberty等深入研究了该病的病理学并将其命名为“鸭传染性浆膜炎”。RA血清型较多，分类方法较为复杂，并偶尔有新血清型的报道，至今已发现了25个血清型。我国于1982年首次报道了RA在北京郊区的流行，随后在全国各地不断有RA流行的报道。至今，RA已在我国广泛存在，且血清型较多，各地都有代表血清型。

摘要： 从吉林某鸭场疑似鸭疫里默氏杆菌感染病，死鸭的脑部、心血分离到一株革兰氏阴性小杆菌，经细菌形态、生理生化、病理学观察、血清型鉴定与动物回归等试验，结果均证实分离株为RA，并将其命名为JL-RA1。该分离株对青霉素、替米考星、氟苯尼考高度敏感，而对头孢他啶、头孢曲松、磷霉素等多种药物完全耐药。

摘要： 文中采用体外抑菌活性试验对中药有效部位进行抑菌测定.通过试验证实,黄连总生物碱、黄芩总苷、叶下珠总黄酮、茵陈总黄酮对鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌抑菌效果较好,对鸭疫里默氏杆菌的最低抑菌浓度(MIC)范围为25.5mg/mL-260mg/mL,对大肠杆菌的MIC范围为15mg/mL-150 mg/mL.

摘要： 水禽传染性浆膜炎又称鸭疫里默氏杆菌病(曾用名:鸭疫巴氏杆菌Pasteurella anatipestifer Infection)是由鸭疫里默氏杆菌引起的一种接触性传染病. 大体病变基本一致，主要特征是浆膜出现广泛性的多少不等的纤维素渗出。诊断本病需要进行细菌分离培养和鉴定，鉴定其主要生化特性是否与鸭疫里默氏杆菌相符合。由于本菌极易产生抗药性，一种药物使用一个疗程后其作用已大大降低或无多大作用，建议治疗前进行药敏试验。

摘要： 本发明属于兽用生物制品技术领域，具体涉及一种沙门氏菌、鸭疫里默氏杆菌、大肠埃希氏杆菌病三联疫苗。抗原为灭活的鼠伤寒沙门氏菌S01株、鸭疫里默氏杆菌R01株和大肠埃希氏杆菌E01株。本发明的疫苗所使用的三种菌株毒力强高、免疫原性好并具有较好的交叉保护性。本发明制备的疫苗的安全性良好，未出现由疫苗引起的任何局部和全身不良反应。保存期试验中经过性状、安全性试验、效力试验数据的分析，各项指标均稳定有效；效力试验结果证明，三联灭活疫苗能产生良好抗体，并能产生较好的攻毒保护力。

摘要： 本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌混合培养及重新分离的方法。该鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌混合培养及重新分离的方法，包括(1)菌种复苏；(2)筛选对抗生素敏感性差异的鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌；(3)以一定的时间间隔或不同的稀释浓度将鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌接种至培养基进行混合培养；(4)测定步骤(2)中抗生素对筛选出的鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌的最小抑菌浓度：(5)制备抗生素板培养基；(6)分离混合培养菌液。该鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌混合培养及重新分离的方法，在鸭禽体外使两种菌能够共同生长20代以上，为探讨二者在共生条件下的耐药性转移及相关机制提供了条件，对养鸭业的疾病防治具有重要的意义。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种鸭疫里默氏杆菌－大肠杆菌穿梭表达载体及其构建方法和应用。本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌－大肠杆菌穿梭表达载体，其核苷酸序列为：SEQIDNO:1。本发明还公开了一种鸭疫里默氏杆菌－大肠杆菌穿梭表达载体构建方法和应用。本发明构建的鸭疫里默氏杆菌－大肠杆菌穿梭表达载体pRES能在鸭疫里默氏杆菌和大肠杆菌中稳定存在和复制，携带的外源基因可在鸭疫里默氏杆菌中稳定表达，可用于鸭疫里默氏杆菌缺失突变株的互补试验、重组鸭疫里默氏杆菌疫苗的研制等，具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明属于兽用生物制品技术领域，具体涉及一种沙门氏菌、鸭疫里默氏杆菌、大肠埃希氏杆菌病三联疫苗。抗原为灭活的鼠伤寒沙门氏菌S01株、鸭疫里默氏杆菌R01株和大肠埃希氏杆菌E01株。本发明的疫苗所使用的三种菌株毒力强高、免疫原性好并具有较好的交叉保护性。本发明制备的疫苗的安全性良好，未出现由疫苗引起的任何局部和全身不良反应。保存期试验中经过性状、安全性试验、效力试验数据的分析，各项指标均稳定有效；效力试验结果证明，三联灭活疫苗能产生良好抗体，并能产生较好的攻毒保护力。

摘要： 本发明提供了一种鸭疫里默氏杆菌、大肠埃希氏杆菌二联灭活疫苗的制备方法及其制品。该方法包括如下步骤：用免疫原性良好的鸭疫里默氏杆菌I型、II型及大肠埃希氏菌O78型接种于适宜培养基培养，经甲醛溶液灭活后，与油佐剂乳化制成。用于预防鸭的传染性浆膜炎和大肠埃希氏菌病。本发明的疫苗的制备方法操作简单，制备出的疫苗性能稳定，能有效地预防鸭传染性浆膜炎和鸭大肠杆菌病这两种疾病。

摘要： 本发明属于兽用生物制品技术领域，更具体是涉及一种鸭疫里默氏杆菌、大肠埃希氏杆菌二联灭活疫苗及其制备方法。具体是用免疫原性良好的鸭疫里默氏杆菌I型、II型及大肠埃希氏菌O

摘要： 本发明涉及一种用于大肠杆菌‑鸭疫里默氏杆菌的高效穿梭质粒、制备方法及其应用，穿梭质粒的基因序列如SEQ ID NO.1所示，是在质粒pPM5的基础上进行改造的，先将鸭疫里默氏杆菌复制起始基因(pRA0726 ori)克隆到此质粒中，然后将转移位点(oriT)克隆到上述质粒中，使此穿梭质粒能够通过高效的结合转移导入鸭疫里默氏杆菌中，且能稳定的复制。为了方便基因片段插入穿梭质粒上且提高基因的表达量，将在穿梭质粒上克隆一段带有多个内切酶位点的高表达启动子序列(High EXP)。本发明所得穿梭质粒可以在鸭疫里默氏杆菌中稳定存在，用于基因敲除株的回补。质粒较小且具有多个多克隆位点，易于操作。结合转移效率非常高。

摘要： 本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌混合培养及重新分离的方法。该鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌混合培养及重新分离的方法，包括(1)菌种复苏；(2)筛选对抗生素敏感性差异的鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌；(3)以一定的时间间隔或不同的稀释浓度将鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌接种至培养基进行混合培养；(4)测定步骤(2)中抗生素对筛选出的鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌的最小抑菌浓度：(5)制备抗生素板培养基；(6)分离混合培养菌液。该鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌混合培养及重新分离的方法，在鸭禽体外使两种菌能够共同生长20代以上，为探讨二者在共生条件下的耐药性转移及相关机制提供了条件，对养鸭业的疾病防治具有重要的意义。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种鸭疫里默氏杆菌－大肠杆菌穿梭表达载体及其构建方法和应用。本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌－大肠杆菌穿梭表达载体，其核苷酸序列为：SEQIDNO:1。本发明还公开了一种鸭疫里默氏杆菌－大肠杆菌穿梭表达载体构建方法和应用。本发明构建的鸭疫里默氏杆菌－大肠杆菌穿梭表达载体pRES能在鸭疫里默氏杆菌和大肠杆菌中稳定存在和复制，携带的外源基因可在鸭疫里默氏杆菌中稳定表达，可用于鸭疫里默氏杆菌缺失突变株的互补试验、重组鸭疫里默氏杆菌疫苗的研制等，具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明涉及家禽细菌病的诊断技术领域，尤其涉及用于鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌多重PCR检测用引物组试剂盒及其检测方法。该试剂盒包含7个冻存管，其中2个冻存管分别装有2×PCR核心试剂预混物，其它5个冻存管分别装有鸭疫里默氏杆菌DNA溶液，鸭疫里默氏杆菌阳性DNA溶液，DL2000分子量标准溶液，ddH