金纳米粒子固相萃取-高效液相色谱同时测定人血浆中四种吲哚胺

摘要

利用柠檬酸-金纳米粒子(citrate-AuNPs)与吲哚环之间的特异性吸附作用,建立了citrate-AuNPs固相萃取-高效液相色谱同时测定人血浆中色氨酸、5-羟色胺、5-羟吲哚乙酸和褪黑素的方法.在优化的萃取和分离条件下,采用C18柱为色谱分离柱,由甲醇(A)和40 mmol·L-1磷酸二氢钠-磷酸(pH 4.0)组成流动相(B),梯度洗脱程序(v/v):0～4 min 20％A;4～15 min 55％A;荧光检测λex=254 nm,λem=338 nm.四种吲哚胺的浓度分别在1～500 nmol·L-1、0.2～400 nmol·L-1、0.4～800 nmol·L-1和0.1～200 nmol·L-1内具有良好线性关系,相关系数均高于0.99.方法检出限(S/N=3)在0.1 nmol·mL-1～0.2 nmol· mL-1之间,回收率在86％ ～105％之间.该方法能有效降低生物样品的基体干扰,并通过富集提高传统检测方法的灵敏度.将该方法应用于老年痴呆病(AD)高发组和对照组组人血浆测定,结果显示:AD高发组四组分水平均显著低于对照组(P＜0.05),与人脑脊液的规律一致.