双重PCR检测黄秋葵储藏期间青霉和链格孢菌条件的优化

摘要

以黄秋葵为材料,分离纯化在贮藏过程中引起腐烂的主要病原真菌青霉和链格孢菌.根据基因库上的序列,针对青霉和链格孢菌在18SRNA的序列设计2对引物,建立了用于检测黄秋葵青霉和链格孢菌双重PCR检测方法,并对PCR扩增条件进行了优化,优化条件如下:引物Alt4、Alt5和PenF'、PenR的比例为2:1、退火温度为52℃、Mg2+浓度为2.5 mmol/L、dNTP浓度为0.08 mmol/L、循环数为35、延伸时间为50 s、退火时间为30 s.结果表明,该方法灵敏度较高、特异性强.该试验可以为黄秋葵在储藏期间的病害防治提供重要指导依据.