利用PCR方法鉴定甲醇酵母转化子的表型

摘要

本文以含外源基因的甲醇酵母表达载体ｐＰＩＣ９／Ｅ２Ｆ－１－ＤＢ质粒ＤＮＡ电转化甲醇酵母ＧＳ１１５，小规模抽提所得转化子的总ＤＮＡ，并以其为模板，以乙醇氧化酶（ＡＯＸ１）５’端序列和３’端的ＴＴ序列为引物，进行ＰＣＲ反应。ＰＣＲ产物走０．８％Ａｇａｒｏｓｅ电泳，通过对ＰＣＲ产物的电泳带型分析，鉴定出甲醇酵母转化子的表型，即Ｍｕｔ＾＋或Ｍｕｔ＾ｓ。这一鉴定结果为转化子的诱导表达产物的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ图