农杆菌介导的玉米转化后分化和生根条件优化

摘要

通过诱导5种自交系玉米授粉10～12 d的未成熟幼胚,产生胚性愈伤组织,以农杆菌介导法,分别转化'18-599(H)'、'齐319'、'综31'、'Z674'和'郑58'等5种玉米自交系.以GUS基因作为报告基因进行组织化学染色和潮霉素磷酸转移酶基因片段PCR特异扩增等方法检测都证明了外源基因的成功转化.对5种自交系玉米的出愈率、抗性愈伤率、转化率等指标进行了详细统计,并对分化培养基中附加不同细胞分裂素的分化效果以及对不同生根培养基的生根效果进行比较、优化,结果发现,通过优化抗性愈伤的最佳分化培养基(N6+1.0 mg·L-1KT)和最佳生根培养基(1/2 MS),使'18-599(H)'的转化效率最高达6.1%,'齐319'次之为3.5%.