芹菜素对人结肠癌HCT-8细胞生长抑制和诱导凋亡作用研究

摘要

近年来，结肠癌的发病率呈逐年升高趋势，是我国常见恶性肿瘤之一，严重危害人类健康。临床对结肠癌的治疗仍以手术、化疗及其他辅助治疗为主。术后化疗毒副作用较多，对人体带来一定的损伤。芹菜素（apigenin，API）是一种黄酮类化合物，大量存在于水果、蔬菜、豆类、茶叶中。研究发现芹菜素具有抗癌、降压、降血脂、扩血管、抗炎等作用。关于芹菜素抗消化道肿瘤的研究，特别是对结肠癌的研究少见报道，其杀伤结肠癌等癌细胞的作用机制尚未明确。本研究主要以人结肠癌HCT-8细胞为研究对象，观察芹菜素对HCT-8细胞的生长抑制和诱导凋亡的作用，并对芹菜素杀伤人结肠癌HCT-8细胞的作用机制进行初步探讨。　　为初步观察芹菜素对结肠癌细胞有无生长抑制作用，本实验首先采用MTT法观察芹菜素对结肠癌细胞生长和增殖的影响，实验分阴性对照组、5μg·ml-1芹菜素组、10μg·ml-1芹菜素组、15μg·ml-1芹菜素组、20μg·ml-1芹菜素组，分别作用24h、48h、72h；采用了DNA凝胶电泳观察不同浓度（5μg·ml-1芹菜素组、10μg·ml-1芹菜素组、15μg·ml-1芹菜素组、20μg·ml-1芹菜素组和阴性对照组）对HCT-8的细胞的诱导凋亡情况；还采用流式细胞术检测不同浓度芹菜素（10μg·ml-1芹菜素组、20μg·ml-1芹菜素组）诱导HCT-8的细胞早期凋亡情况。同时对不同浓度芹菜素（5μg·ml-1、10μg·ml-1、15μg·ml-1、20μg·ml-1）做用于HCT-8的细胞后Caspase-3、Caspase-6酶活性进行了检测。　　实验发现，随着芹菜素浓度（5μg·ml-1、10μg·ml-1、15μg·ml-1、20μg·ml-1）的增加，细胞凋亡率逐渐增高且呈一定的量效关系；5μg·ml-1芹菜素组、10μg·ml-1芹菜素组、15μg·ml-1芹菜素组、20μg·ml-1芹菜素组作用于HCT-8细胞48小时检测到DNA Ladder，用药组梯状条带的亮度明显亮于对照组，且与药物剂量正相关；流式细胞术检测10μg·ml-1芹菜素组、20μg·ml-1芹菜素组，作用24小时细胞凋亡率分别为(19.16±0.14)％及（26.67±0.13)%；Caspase-3、Caspase-6酶活性显著增强。　　综上所述，本研究发现芹菜素对人结肠癌HCT-8细胞有抑制其生长、诱导其凋亡的作用。Caspase-3及 Caspase-6酶活性有显著增加，芹菜素的诱导结肠癌细胞凋亡作用可能是通过此途径来完成的。但芹菜素抑制人结肠癌HCT-8细胞增殖是否还有其他途径有待进一步的研究。

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芹菜素对人结肠癌HCT-8细胞生长抑制和诱导凋亡作用研究

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