1绪 论
1.1 鸭胚蛋
1.1.1 鸭胚蛋的概况
1.1.2 胚胎蛋中功能成分
1.1.3 鸭胚蛋产品的现状和研究进展
1.2 多肽
1.2.1多肽的简介
1.2.2 功能多肽的分类
1.2.3 功能性多肽在食品中的应用及研究进展
1.3 抗氧化物质
1.3.1 抗氧化剂的简介
1.3.2 自由基的产生及清除
1.3.3 抗氧化剂在食品中的应用
1.4 研究内容及研究意义
1.5 技术路线
2鸭胚蛋孵育过程中抗氧化能力及其抗氧化物质的变化
2.1 鸭胚蛋中的抗氧化物质
2.2.1 实验材料
2.2.2 仪器与设备
2.3 实验方法
2.3.1 鸭胚匀浆液的制备
2.3.2 鸭胚匀浆总抗氧化能力测定
2.3.3 内源性抗氧化物质含量测定
2.3.4 MDA水平的测定
2.3.5 统计分析
2.4 结果与讨论
2.4.1 总抗氧化能力在鸭胚胎蛋孵育期间变化
2.4.2 鸭胚胎蛋孵育期间T-SOD含量变化
2.4.3 维生素C和维生素E在鸭胚胎蛋孵育期间含量变化
2.4.4 过氧化氢酶在鸭胚胎蛋孵育期间含量变化
2.4.5 谷胱甘肽过氧化物酶在鸭胚胎蛋孵育期间含量的变化
2.4.6 谷胱甘肽在鸭胚胎蛋孵育期间含量的变化
2.4.7 丙二醛在鸭胚蛋孵育期间含量的变化
2.5 小结
3鸭胚多肽的抗氧化特性及对HepG2细胞氧化损伤的保护作用
3.1 H2O2诱导HepG2细胞氧化应激模型
3.2.1 实验材料
3.2.2 仪器与设备
3.3 实验方法
33.1 鸭胚多肽粉的制备
3.3.2 体外抗氧化实验
3.3.3 鸭胚蛋多肽对HepG2细胞的毒性作用
3.3.4 鸭胚蛋多肽对H2O2诱导的HepG2细胞的保护作用
3.3.5 鸭胚蛋多肽对H2O2诱导的HepG2细胞内ROS含量的测定
3.3.6 鸭胚蛋多肽对H2O2诱导的HepG2细胞LDH、MDA、CAT、SOD和GSH-px的影响
3.3.7 统计分析方法
3.4 结果与讨论
3.4.1 不同分子量段的鸭胚多肽体外抗氧化能力
3.4.2 鸭胚蛋多肽对HepG2细胞的毒性作用
3.4.3 鸭胚蛋多肽对H2O2诱导的HepG2细胞氧化损伤的影响
3.4.4 鸭胚蛋多肽对H2O2诱导的HepG2细胞内ROS含量的影响
3.4.5 鸭胚蛋多肽对H2O2诱导的HepG2细胞中SOD、CAT和GSH-px活性的影响
3.5 小结
4鸭胚多肽ZTI肽段的分子组成和功能注释
4.1 功能注释
4.2.1 实验材料
4.2.2 实验仪器
4.3.1 样品准备
4.3.2 总蛋白定量和SDS-PAGE相对分子量测定
4.3.3 蛋白酶解和多肽脱盐
4.3.4 质谱上机方法及数据分析
4.3.5 利用生物信息学方法预测多肽的功能
4.4 实验结果
4.4.1 GO数据库标注ZT1粗肽分子组成
4.4.2 GO数据库注释的抗氧化肽
4.4.3 SVM预测ZT1中肽的功能
4.4.4 抗氧化肽基预测的抗氧化多肽的特点
4.4.5 SVM方法预测的其他功能多肽的特性
4.4.6 COG、KEG、IPR和GO数据库注释结果
4.5 小结
5 GO注释的抗氧化肽活性验证
5.1 氨基酸与抗氧化性的关系
5.2.1 实验材料
5.2.2 实验仪器
5.3 实验方法
5.4.1 GO筛选出的多肽体外抗氧化能力
5.4.2 合成抗氧化多肽的毒性作用
5.4.3 TD12、LA18和RK14对H2O2诱导的HepG2细胞的保护作用
5.4.4 TD12、LA18和RK14对 H2O2诱导的HepG2细胞内ROS含量的影响
5.4.5 TD12对H2O2诱导氧化应激作用的HepG2细胞中Bcl-2, cleaved caspase-3和cleaved PARP蛋白的影响
5.5 小结
6结论与展望
6.1 结论
6.2 展望
参考文献
附录
A. 15日龄鸭胚蛋中的功能多肽
B. 15日龄鸭胚蛋中的其他多肽
C.COG注释结果
D. KEGG注释结果
E. IPR注释结果
F. GO注释结果
G. 基于4个数据库/方法的功能蛋白注释
H. 作者在攻读硕士学位期间所发表的论文目录
I. 学位论文数据集
致谢
重庆大学;
