以牛初乳为原料制备免疫调节乳制品

摘要

蛋白质中含有许多活性成分，通过酶解或其他手段可释放出来。以牛初乳为原料，分离酪蛋白、乳清蛋白及乳铁蛋白等主要成分，分别水解，检测水解物的免疫刺激指数，以刺激指数为指标确定水解条件，并将水解物与乳粉按比例混合，形成配方奶粉。实验过程中，将乳清蛋白、酪蛋白在浓度分别为2％、4％、6％、8％，酶与底物比分别为1:30、1:60、1:90的条件下用胰蛋白酶水解。乳铁蛋白在浓度分别为2％、4％、6％，酶与底物比分别为1:30、1:60、1:90的条件下用胃蛋白酶进行水解。采用MTT法分别以浓度为10μg/ml、100μg/ml、1000μg/ml的乳清蛋白、酪蛋白、乳铁蛋白以及三种蛋白的水解产物对脾淋巴细胞的免疫刺激作用进行检测，结果表明：三种浓度下的水解产物对脾淋巴细胞的免疫刺激指数SI值明显高于三种蛋白本身SI值。酪蛋白对脾淋巴细胞的SI值最高为2.53，酪蛋白水解产物在底物浓度6％，酶与底物比为1:30，1000μg/ml条件下SI值最高，为5.83；乳清蛋白对脾淋巴细胞的SI最高值为：2.05，乳清蛋白水解产物在底物浓度8％，酶与底物比为1:30，1000μg/ml时SI值最高，为4.89；乳铁蛋白对脾淋巴细胞的SI值最高为2.29，乳铁蛋白水解产物在底物浓度6％，酶与底物比为1:30，1000μg/ml时SI值最高，为5.33。以免疫刺激指数作为指标，选择以上三个条件为最优水解条件。 将得到的最优水解条件的产物与乳粉按以下比例混合做成乳品配方，在10mg/ml，100mg/ml浓度下进行免疫检测： (1)奶粉与乳铁蛋白水解产物，酪蛋白水解产物，乳清蛋白水解产物分别按100g:1g混合，均在100mg/ml浓度下SI最高，分别为5.20，5.70，4.77； (2)依牛奶中三种蛋白比例成分添加水解产物，即酪蛋白水解产物：乳清蛋白水解产物：乳铁蛋白水解产物为80％:19.5％:0.5％，添加蛋白水解产物的总量为6g，在100mg/ml浓度下SI最高，为3.90； (3)将婴幼儿和中老年奶粉中分别添加6g酪蛋白水解产物，均在100mg/ml浓度下SI最高，分别为4.30和4.50； (4)婴幼儿奶粉和中老年奶粉，均在100mg/ml浓度下SI最高，为2.40和2.64； (5)婴幼儿和中老年奶粉中分别掺入辅料，均在100mg/ml时SI最高，分别为2.39和2.47 (6)将(2)与(5)混合，进行免疫检测，婴幼儿配方和中老年配方均在100mg/ml时SI最高，分别为6.10和5.49； (7)固定乳铁蛋白水解物的量为0.5g，乳清蛋白水解产物和酪蛋白水解产物的总量为6g。调整酪蛋白水解产物与乳清蛋白水解产物的比为3:1；3:2；1:1，均在100mg/ml浓度下SI最高，分别为4.60，5.42和5.40。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章 前言

1.1课题的研究背景

1.2国内外研究进展

1.3牛初乳中的营养成分和功能性组分

1.4初乳的特殊作用

1.5免疫系统

1.6开展此课题的依据

1.7开展此课题的意义

第二章 材料和方法

2.1从牛初乳中提取乳酪蛋白、乳清蛋白、乳铁蛋白

2.1.1实验材料

2.1.2实验仪器

2.1.3实验方法

2.2酪蛋白水解产物的制备

2.3乳清蛋白水解产物的制备

2.4乳铁蛋白水解产物的制备

2.5 MTT法检测水解产物对脾淋巴细胞增殖的影响

2.6用SPSS软件对免疫刺激指数进行分析

2.7婴幼儿和中老年免疫调节乳制品的配方设计

第三章 实验结果

3.1胰蛋白酶水解酪蛋白

3.2胰蛋白酶水解乳清蛋白

3.3胃蛋白酶水解乳铁蛋白

3.4 MTT法测定三种蛋白水解产物的免疫刺激指数

3.4.1乳铁蛋白及其水解产物免疫刺激指数

3.4.2乳清蛋白及其水解产物的免疫刺激指数

3.4.3酪蛋白及其水解产物的免疫刺激指数

3.5 MTT法测定配方对脾淋巴细胞增殖的影响

3.5.1对配方进行免疫检测

3.5.2对配方的免疫刺激指数进行T-test检验

第四章 分析与讨论

4.1水解度与免疫刺激指数的关系

4.2 不同配方比例与功能关系的分析

第五章 结论

参考文献

论文、参加科研情况说明

致谢