昆仑雪菊成分鉴定及抗氧化相互作用研究

摘要

昆仑雪菊又名两色金鸡菊，一年生草本植物，具有特殊芳香气味，原产于美国中西部，现在中国新疆地区也有大规模种植。大量研究结果显示，昆仑雪菊有很多的功能活性，其中抗氧化、降压活性尤为显著，而黄酮类化合物的抗氧化活性更为突出，然而对其相互作用的研究鲜有文献报道。本研究利用正丁醇提取得到粗提物，然后采用多种高效、科学的分离纯化方法对其进行分离，并鉴定其中的化合物;然后选取先前实验中分离得到的5个具有强抗氧化活性的黄酮类化合物马里苷、金鸡菊噢、黄杉素、紫铆因和奥卡宁，以1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基清除能力为指标，采用Chou-Talalay中效原理设计实验，初步探究了昆仑雪菊中黄酮类化合物的抗氧化相互作用;并且采用量子化学密度泛函理论(DFT)的B3LYP/6-311G++(2d，2p)//B3LYP/6-31G方法对马里苷、金鸡菊噢、黄杉素、紫铆因和奥卡宁等5个黄酮类化合物进行了结构优化和能量计算。分析了5个黄酮分子的几何构型、不同位置酚羟基解离焓、HOMO和LUMO前线分子轨道图及其能级差，多方面阐释了5个化合物的理论抗氧化能力。研究结果如下:
　　(1)8个单体化合物经鉴定分别为:6E，12E-二烯-8，10-二炔-1-羟基-3S-α-L-阿拉伯葡萄糖苷(1)，coreosides B(2)，coreosides A(3)，1-羟基甾醇糖苷(4)，coretinphenol(5)，脱镁叶绿素a(6)，对香豆酸甲酯(7)，异奥卡宁(8)，其中1号化合物为新化合物。
　　(2)抗氧化相互作用研究结果表明:金鸡菊噢与紫铆因、黄杉素与紫铆因之间具有抗氧化中等协同作用，它们对清除DPPH自由基的加权平均联合作用指数(weightedaverage combination index，CIwt)值分别为0.824和0.749。另外，金鸡菊噢与紫铆因复配，当半抑制浓度(IC50)大于1时，CIwt值小于0.90，出现协同效应。3种化合物联合使用时，清除DPPH自由基的CIwt值均大于1，不存在协同抗氧化作用。
　　(3) DFT研究结果表明:昆仑雪菊中黄酮分子的抗氧化活性与其羟基数目、氢键数目有关;羟基的活性因其位置不同而有所差异，且5个黄酮分子的B环4'位羟基的解离焓都最小，是抗氧化作用的主要活性位点;C环3位上的羟基并没有提高黄杉素的抗氧化活性。

目录

声明

论文说明

摘要

第1章 绪论

1．1 昆仑雪菊研究概述

1．1．1 昆仑雪菊的形态特点及栽培特性

1．1．2 昆仑雪菊的功效

1．2 昆仑雪菊的化学成分研究进展

1．2．1 黄酮类成分

1．2．2 苯丙素类成分

1．2．3 炔类成分

1．2．4 其他成分

1．3 昆仑雪菊抗氧化活性的研究进展

1．3．1 抗氧化活性

1．3．2 抗氧化相互作用

1．4 密度泛函理论研究抗氧化活性

1．5 研究目的和意义

1．6 研究内容

1．6．1 昆仑雪菊中活性成分的分离纯化及结构鉴定

1．6．2 昆仑雪菊中黄酮类化合物的抗氧化相互作用

1．6．3 昆仑雪菊中黄酮类化合物抗氧化活性的DFT研究

第2章 昆仑雪菊中活性成分的分离与鉴定

2．1 材料与方法

2．1．1 实验材料与仪器

2．1．2 实验方法

2．2 结果分析

2．2．1 提取与分离

2．2．2 昆仑雪菊单体化合物的结构解析

2．3 讨论

2．4 本章小结

第3章 昆仑雪菊黄酮类化合物的抗氧化相互作用研究

3．1 材料与方法

3．1．1 实验材料与仪器

3．1．2 实验方法

3．2 结果与分析

3．2．1 5种化合物的抗氧化活性

3．2．2 5种化合物两两复合物的抗氧化活性

3．2．3 5种化合物三者复合物的抗氧化活性

3．3 讨论

3．3．1 结构的影响

3．3．2 浓度的影响

3．3．3 体内实验的有关研究

3．4 本章小结

第4章 昆仑雪菊中5个黄酮类化合物抗氧化活性的DFT研究

4．1 计算方法

4．2 结果与分析

4．2．1 分子几何构型和结构参数

4．2．2 酚羟基的解离焓(BDE)分析

4．2．3 前线分子轨道及其轨道的能级分析

4．3 讨论

4．4 本章小结

第5章 结论与展望

5．1 结论

5．2 展望

参考文献

致谢

作者简介