二氧化硅/壳聚糖修饰茶多酚纳米脂质体的结构和生物利用性

摘要

脂质体作为一种新型的运载体系，已经应用于医药，化妆品和食品等领域。但是其本身存在着诸多不稳定问题，如易聚集，包裹药物释放快等等，这些都限制了脂质体作为运载体系的应用。近年来提出的修饰脂质体通过了多种方式，如在脂质体表面以聚电解质沉降的方式进行表面修饰，制备磷脂衍生物制备得到新型特性的脂质体等等来提高脂质体的性能。本文以茶多酚（茶多酚具有强大的生理活性物质，具有抗氧化，抗癌，抗炎症等特性，并且容易检测。）作为芯材，利用乙醇注入结合动态高压微射流方法制备茶多酚纳米脂质体（TPN），通过对TPN进行修饰，继而制备了一种壳聚糖修饰脂质体(CH-TPN)，并且在CH-TPN的基础上制备得到了新型的二氧化硅-壳聚糖-脂质体(S-CH-TPN)，对其修饰形成的机理，修饰剂对脂质体结构的影响，修饰剂对茶多酚脂质体生物利用性的影响进行了深入研究。
　　茶多酚脂质体TPN粒径为101.3±1.49nm，电位为-10.59±0.35mV，并且在其基础上制备了修饰脂质体CH-TPN和S-CH-TPN，其粒径分别为231.83±0.57nm，573.6±2.89nm，电位分别为12.65±0.04mV，7.82±0.28mV。得到的3个样品对茶多酚的包覆率分别为76.62±6.02％，80.64±1.92%和74.05±4.62%，并且分散系数均较小，体系很均匀。粒径、电位的测定证实了修饰层的存在。对修饰脂质体形成机理和可能结构进行了分析，CH-TPN呈现毛糙的修饰层，壳聚糖如补丁一样吸附在脂质体外层，同时其疏水结构也插入脂质体膜中。S-CH-TPN中硅层通过与壳聚糖的静电作用和硅醇基与壳聚糖羟基的脱水作用，使脂质体外层的修饰层更加紧密。
　　利用红外，原子力显微镜AFM，透射电镜TEM，表面张力和流变仪，研究了脂质体修饰前后结构的变化。结果表明，修饰剂的存在导致了部分官能团的消失和新官能团的出现，可见修饰剂与脂质体膜双分子层之间发生了结合作用和氢键作用；AFM和TEM图像均进一步证实了CH-TPN的修饰层壳聚糖覆盖在脂质体上，而S-CH-TPN形成的结构支撑了脂质体的形态，提高了其结构刚性；表面张力和流变学性质研究均表明，修饰剂的存在影响了脂质体膜结构的刚性和膜的流动性。
　　脂质体修饰前后在PBS缓冲液中的茶多酚释放曲线，CH-TPN显示出最佳的释放效果，12h内释放了21.5±1.37%,体外抗氧化实验中S-CH-TPN显示出最强的DPPH自由基清除能力，其次是CH-TPN，TPN最低，并且三者均表现出相近的FRAP还原能力。
　　连续的体外消化实验和单独的肠液消化实验表明，CH-TPN在胃液环境下始终保持最佳的稳定性，CH-TPN对茶多酚组分EGCG表现出最佳的保护效果，S-CH-TPN则对茶多酚组分ECG表现出更好的体外消化保护效果。并且对比两种消化方式表明，胃液的消化会影响样品在肠液中的消化情况。

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第1章 前言

1.1 脂质体概述

1.2修饰脂质体

1.3 茶多酚

1.4 选题背景和意义

1.5 主要研究内容

第2章 二氧化硅/壳聚糖修饰茶多酚纳米脂质体的制备和作用机理

2.1 前言

2.2 实验材料与设备

2.3 实验方法

2.4 结果与分析

2.5 本章小结

第3章 二氧化硅/壳聚糖修饰茶多酚纳米脂质体的结构性质

3.1 前言

3.2 实验材料与设备

3.3 实验方法

3.4 结果与分析

3.6 本章小结

第4章 二氧化硅/壳聚糖修饰茶多酚纳米脂质体的生物利用性

4.1 前言

4.2 实验材料与方法

4.3 实验方法

4.4 结果与讨论

4.5 本章小结

第5章 主要结论和创新点

5.1 全文主要结论

5.2 全文主要创新点

5.3 进一步工作方向

致谢

参考文献

攻读学位期间的研究成果