柑橘中类胡萝卜素的提取、分离、鉴定及其稳定性研究

摘要

本文研究了柑橘中类胡萝卜素的提取、分离、纯化条件以及稳定性，研究结果为柑橘汁的工业化生产及贮藏、运输提供理论基础和应用参考。 通过有机溶剂提取柑橘中类胡萝卜素，确定了最佳提取条件为：石油醚：丙酮=1：1物料比1：20，温度为40℃，提取次数为2次，浸提时间120min。 本研究建立了类胡萝卜素的分析方法，包括薄层层析法、柱层析、高效液相色谱和液质联用法。柱层析使用氧化镁—硅藻土（1：2，w/w）填料，采用丙酮：石油醚为3：7和1：1两个不同比例的有机溶剂洗脱，结合高效液相色谱（HPLC）法，色谱条件为：色谱柱hypersilODS2柱（200mmx4．6mmi．d．），流动相乙腈：甲醇：二氯甲烷（85：13：2），在此条件下，分离得到了9种类胡萝卜素。 考虑到类胡萝卜素在分离纯化过程中易降解，为了得到更加可靠的信息，使用了液质联用分析类胡萝卜素，质谱条件：APCI+离子源，离子源温度150℃，m/z（500—800），YMCC30色谱柱（150mm×4．6mmi．d．），流动相A乙腈：甲醇（75：25），B100％MTBE，流速1ml/min，梯度洗脱程序：Omin95％A，5％B；9min86％A，14％B；19min75％A，25％；34min50％A，50％；40min95％A，5％B；50min95％A，5％；流速1ml/min，检测波长450nm，柱温25℃，在此条件下，鉴定了10种类胡萝卜素。 植物组织中含氧类胡萝卜素通常和脂肪酸以酯的形式存在，通过HPLC检测未皂化的类胡萝卜素，发现了约7种酯化的类胡萝卜素，具体和何种脂肪酸以何种方式结合，有待进一步的研究。 柑橘中类胡萝卜素的稳定性实验表明：类胡萝卜素在高温下不稳定；对室外日光、紫外光不稳定，对室类光影响不大；在碱性环境中相对比酸性要稳定；加入金属离子如Fe3+、Fe2+、Cu2+、Al3+不稳定，其他金属离子影响不大；加入氧化剂有破坏作用，加入还原剂影响不大且能起到一定保护色素的效果。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章文献综述

1.柑橘类胡萝卜素的研究现状

1.1类胡萝卜素概述

1.2类胡萝卜素的理化特性

1.3加工过程对类胡萝卜素的影响

1.4类胡萝卜素的生物活性研究

1.5类胡萝卜素的生物合成

2 HPLC在类胡萝卜素检测中的应用

2.1类胡萝卜素的提取和样品前处理

2.2类胡萝卜素提取

2.3类胡萝卜素皂化

2.4色谱法在类胡萝卜素分析中的应用

2.5用RP-HPLC测定类胡萝卜素酯

2.6类胡萝卜素的定性定量

3.本课题研究的目的及意义

第二章柑橘类胡萝卜素的提取工艺研究

1材料与方法

1.1实验材料

1.2实验主要试剂

1.3实验仪器设备

1.4实验方法

1.5测定方法

2结果与分析

2.1柑橘中类胡萝卜素最佳提取条件的单因素实验

2.2柑橘类胡萝卜素提取的正交实验

2.3结论

第三章柑橘类胡萝卜素的分离鉴定

1材料与方法

1.1材料来源及处理

1.2实验试剂

1.3实验仪器

1.4实验方法

2结果与分析

2.1色素提取液的紫外可见光谱

2.2色素提取液的薄层分析

2.3提取液的柱层析分离

2.4高效液相色谱法分析柑橘汁中类胡萝卜素含量

2.5 LC-MS分析果汁中的类胡萝卜素

2.6类胡萝卜素酯的色谱分析

3结论

第四章柑橘汁中类胡萝卜素稳定性研究

1材料与方法

1.1材料与试剂

1.2主要仪器

1.3试验方法

2结果与分析

2.1温度对类胡萝卜素稳定性的影响

2.2光照对类胡萝卜素稳定性的影响

2.3氧化剂、还原剂对类胡萝卜素稳定性的影响

2.4金属离子对类胡萝卜素稳定性的影响

2.5酸、碱对类胡萝卜素稳定性的影响

3本章小结

参考文献

致谢