多种乳酸菌混合制剂及发酵乳活菌计数方法的研究

摘要

随着发酵乳产业的蓬勃发展，发酵乳制品所使用的发酵剂已不再仅限于由嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌组成，越来越倾向于使用多菌种混合的发酵剂。然而，乳酸菌混合液中各种乳酸菌菌数的快捷检测方法还未见报道。因此，相关研究也成为领域内的研究热点之一。
　　本论文选取了保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、动物双歧杆菌和鼠李糖杆菌的混合物作为研究对象进行试验。首先，在原有MRS培养基配方基础上，考察了添加0.05％(m/m)的LiCl对不同菌株的选择计数影响。然后，根据乳酸菌可发酵利用的糖种类的差异，采用甘露醇、鼠李糖、木糖替换MRS培养基中原有的葡萄糖，考察不同糖种类对5种乳酸菌混合液中不同菌株的生长影响，进而实现对可检出乳酸菌的准确计数。并在上述研究的基础上，针对培养时间、温度和接种方法进行了优化。最后将优化的方法在酸奶发酵中间产品、商业化混合菌粉和市售酸奶三种体系中进行了验证。
　　研究结果表明：在正常MRS培养基中添加0.05%的LiCl，只有嗜热链球菌和鼠李糖乳杆菌可以生长；在木糖为单一糖源的MRS改良培养基只有动物双歧杆菌和鼠李糖乳杆菌可以生长；在甘露醇为单一糖源的MRS培养基中只有鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌可以生长；而在鼠李糖为单一糖源的MRS培养基中，只有鼠李糖乳杆菌可以生长。经过优化的培养温度为37℃、培养时间为48h，接种方法为倾注。三种体系中的验证试验表明，在这四种培养基中对适当浓度的混合菌液进行培养，可以计算得到混合菌液中菌株种类以及各自的比例。
　　本研究确定了一种混合菌液中菌种类和数量的快速检测方法，为发酵乳制品的质量控制及研发奠定了一定的理论基础。

目录

多种乳酸菌混合制剂及发酵乳活菌计数方法的研究

Selective enumeration of mixture and ferment milk of kinds of lactic acid bacteria

摘 要

Abstract

目 录

第1章 绪论

1.1 课题背景

1.2 乳酸菌概述

1.2.1 德氏保加利亚乳杆菌

1.2.2 嗜热链球菌

1.2.3 双歧乳杆菌

1.2.4 鼠李糖乳杆菌

1.2.5 嗜酸乳杆菌

1.3 选择性培养基的原理

1.3.1 显色剂法

1.3.2 培养条件法

1.3.3 pH法

1.3.4 抑制剂法

1.3.5 指示剂法

1.3.6 糖源选择培养基

1.4 选择性培养基发展概况

1.4.1 国内研究进展

1.4.2 国外的研究进展

1.5 存在的问题

1.6 本论文的研究内容

第2章 材料与方法

2.1 试验材料

2.1.1 试验试剂

2.1.2 菌种

2.1.3 直投式发酵剂

2.1.4 市售发酵产品

2.2 试验用仪器

2.3 试验方法

2.3.1 菌种的培养及计数

2.3.2 统计分析方法

第3章 选择性培养基的研究

3.1 引言

3.2 嗜热链球菌和乳杆菌的选择培养基的研究

3.3 乳杆菌属内各亚种的区分

3.3.1 培养基设计原理

3.3.2 纯菌液体培养结果

3.3.3 固体培养基计数结果

3.3.4 木糖培养基配制的研究

3.4 培养条件的优化

3.4.1 接种方法和氧气条件的选择

3.4.2 培养温度和培养时间的选择

3.5 本章小结

第4章 选择性培养基的验证

4.1 引言

4.2 已知浓度混合菌的培养

4.2.1 固体培养基混合菌液计数结果

4.2.2 已知浓度的混合菌液在发酵过程中的各菌种数量的变化

4.3 直投式发酵剂的检测实验

4.4 发酵产品检测中的应用试验

4.5 本章小结

结论

参考文献

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致谢