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下水処理水中のβ-グルクロニダーゼ活性を利用した簡易迅速大腸菌定量法の開発

机译:污水处理水中β-葡萄糖醛酸酶活性的简单快速大肠杆菌测定方法的发展

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摘要

大腸菌は糞便汚染の指標であり,大腸菌群に替わる下水処理水の指標細菌としての利用が議論されている.現在の大腸菌数測定法は,培地の作製,希釈,18時間以上の培養,陽性の判定など多大な労力を要する.そこで我々は簡易迅速大腸菌定量法を開発することを試みた.具体的には,下水に特定酵素蛍光基質(4-Methylumbelliferyl-β-D-Glucuronide; MUG),有機物,無機塩類を加え,大腸菌が生産した酵素β-ダルクロニダーゼ(GUS)によってMUGが分解されることで生ずる蛍光をマイクロプレートリーダーで検出することで,陽性を自動的に判定することを試みた.まず,GUSをコードする遺伝子(uidA)量およびそのmRNA発現量を測定し,蛍光強度増加速度(すなわちMUG分解速度)との関連を検討した.次に本法で下水処理水中の大腸菌数を簡易かつ迅速に定量できるかを検討した.
机译:大肠杆菌是粪便污染的指标,讨论了将污水处理水与大肠杆菌组的使用。目前的大肠杆数量测量方法是生产,稀释,18小时或更多的培养,阳性,阳性。它诸如判断的努力。所以我们试图开发一种简单的快速大肠杆菌定量方法。具体地,加入有机物质无机盐的特异性酶荧光基材(4-甲基蛋白晶体;杯子),通过通过检测由微孔板读取器产生的荧光来检测由大肠杆菌产生的酶β-d'Derclonidase(GUS)产生的荧光。首先编码GUS的基因数量和mRNA的量测量表达,检查荧光强度增加速率(即杯子降解速率)之间的关系。接下来,简化了水处理下污水处理中的大肠菌群数量,我检查了定量速度的速度。

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