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特定酵素蛍光基質を用いた下水中の大腸菌群の簡易迅速測定法の開発

机译:使用特定的酶荧光底物开发简单,快速的污水中大肠菌检测方法

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摘要

現在,下水処理場からの放流水の水質の技術上の基準における衛生学的項目としては大腸菌群数が用いられている.大腸菌群数測定の公定法は大腸菌群以外の細菌を阻害する塩を加えた培地による平板培養法である.この方法は操作が煩雑であり長時間の培養が必要といった改善すべき問題点がある.そこで本研究では.下水中の大腸菌群数を簡易かつ迅速に測定できる技術を新規に開発した.本測定法は大腸菌群が特定酵素蛍光基質を分解する際に生ずる蛍光をリアルタイムで測定するもので,サンプル中の大腸菌群数と蛍光強度に強い相関があることを利用する.本測定法はサンプルを液体培地の入ったマイクロプレートに添加するだけという極めて簡便な操作のみで希釈も必要としない.大腸菌群数が200MPN/mL程度およびそれ以上の最終沈殿池越流水であれば2時間で測定が終了する.
机译:目前,从污水处理厂排放的水的质量的技术标准中,大肠菌群的数量被用作卫生项目,测量大肠菌群数量的官方方法是使用能抑制大肠菌群以外的细菌的盐。这是一种使用添加培养基的平板培养方法,由于操作复杂且需要长期培养,因此存在需要改进的问题,因此,本研究中可以简单,快速地测定污水中大肠菌的数量。我们已经开发出一种新技术,该技术能够实时测量当大肠杆菌群分解特定的酶荧光底物时产生的荧光,并且表明在样本中大肠杆菌群的数量与荧光强度之间存在很强的相关性。这种测量方法是一种非常简单的操作,可以将样品添加到装有液体培养基的微孔板中,无需稀释,最终的沉降池中溢出的大肠菌群细菌的水量约为200 MPN / mL或更高。如果是这样,将在2小时内完成测量。

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