NDPK B真核表达载体的构建及其对细胞生长活性的影响

摘要

目的：构建pEGFP-NDPK B真核表达载体，预测NDPK B蛋白的三维结构和活性位点，研究NDPKB表达对细胞生长活性的影响。方法：将目的基因NDPKB连接到pEGFP-N1真核表达载体，转染Vero细胞，通过增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和Western blot分析，鉴定构建的pEGFP-NDPK B真核表达载体的正确性；利用生物信息学工具分析预测NDPK B蛋白的三维结构和可能存在的活性位点；MTT实验检测NDPKB对细胞生长活性的影响。结果：pEGFP-NDPK B真核表达载体构建成功，在Vero细胞中NDPK B和GFP蛋白能有效地融合表达。在线预测了：NDPK B蛋白的三维结构和可能存在的活性位点。MTT实验结果表明，NDPK B对Vero细胞生长活性的抑制率为25.8%，对A549细胞生长活性的抑制率为22.7%。结论：NDPKB能够抑制细胞的生长，对细胞的凋亡具有正调节作用。