表达海肾或萤火虫荧光素酶基因的PRRSV重组质粒的构建方法以及应用

摘要

本发明提供了一种表达海肾荧光素酶和萤火虫荧光素酶基因的蓝耳病病毒(PRRSV)重组质粒的构建方法，及其应用。基于反向遗传操作平台，将海肾荧光素酶和萤火虫荧光素酶基因插入到pHuN4‑F112基因组中，成功构建了pA‑Rluc和pA‑Fluc这两个重组质粒。转染MARC‑145细胞后，二者均成功拯救出了活病毒，并且发现重组病毒vA‑Rluc、vA‑Fluc与亲本毒vHuN4‑F112具有相似的病毒学特性。将其感染MARC‑145细胞或者PAM细胞之后，获得的荧光素酶活性数值可以成为指征PRRSV在这两种细胞上复制水平的另外一种指标。