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用于扩增核糖核酸的方法及分析该方法中RNA或DNA模板的方法

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本发明提供了用于扩增核糖核酸的方法及分析该方法中RNA模板的方法，开发了一种RNA‑PAP的新方法，其可以直接放大RNA模板而无需额外的处理；RNA‑PAP为扩增RNA模板带来了一个全新的机理，其中RNA依赖性DNA焦磷酸化反应和RNA依赖性DNA聚合反应是用3'末端阻断性寡核苷酸引物所串联耦合的，由于这种串连耦合，使得RNA‑PAP对RNA模板的不匹配性具有高度的选择性，从而提供了高度特异性的RNA模板的扩增；此外，经遗传工程产生的突变体聚合酶具有更高的RNA依赖性DNA焦磷酸化反应和RNA依赖性DNA聚合反应的效率。

著录项

公开/公告号CN103266103B

专利类型发明专利
公开/公告日2016-08-31

原文格式PDF
申请/专利权人天津精耐特基因生物技术有限公司;
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申请/专利号CN201310150085.7
发明设计人丁少峰;刘强;
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申请日2013-04-26
分类号C12N15/10(20060101);C12Q1/68(20060101);
代理机构12107 天津市三利专利商标代理有限公司;
代理人李蕊
地址 300000 天津市北辰区青光村北天津医药医疗器械工业园
入库时间 2022-08-23 09:45:51

法律信息

法律状态公告日

法律状态信息

法律状态
2016-08-31

授权

授权
2016-07-27

专利申请权的转移 IPC(主分类):C12N 15/10 登记生效日:20160708 变更前: 变更后: 申请日:20130426

专利申请权、专利权的转移
2013-09-25

实质审查的生效 IPC(主分类):C12N 15/10 申请日:20130426

实质审查的生效
2013-08-28

公开

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1. 用于扩增核糖核酸的方法及分析该方法中RNA或DNA模板的方法 [P] . 中国专利： CN103266103B . 2016.08.31
2. 序列特异性工程改造的核糖核酸酶H和用于确定DNA-RNA杂交物结合蛋白序列偏好的方法 [P] . 中国专利： CN103764820A . 2014-04-30
3. Control primer annealing to improve the specificity of annealing in nucleic acid amplification kit.Methods for amplifying a nucleic acid sequence of a DNA or a mixture of nucleic acids.And for selectively amplifying a nucleic acid sequence of a target DNA or a mixture of nucleic acids, and a sequence of the target nucleic acid from a mRNA.Method for detecting the complementarity of DNA to mRNA differentially expressed in two or more samples of nucleic acid, methods for amplifying a fragment of the cDNA and DNA quickly target.And to amplify a population of cDNAs of filament double full-length complementary to mRNAs cDNAs, and filament double fortified with 5 'complementary to mRNAs,Method to amplify rather than a sequence of nucleotu00ecdeo target at the same time, methods for producing a digital printing gDNA DNA, and RNA in a sample of mRNA.Method for identifying segments of homology is conserved in a family of multigene from a sample of mRNA, a method for the mutagenesis in a target [P] . BR0214741A . 2004-11-23

机译：控制引物退火，以提高核酸扩增试剂盒中退火的特异性。扩增DNA或核酸混合物的核酸序列的方法以及选择性扩增靶DNA或核酸混合物的核酸序列的方法用于检测DNA与两个或多个核酸样品中差异表达的mRNA的互补性的方法，扩增cDNA和DNA片段的方法可快速靶向。全长与mRNA cDNA互补的双细丝cDNA的cDNA群体，以及与mRNA互补的5'增强双细丝的cDNA，同时扩增而不是核苷酸靶序列的方法，产生数字印刷gDNA DNA的方法mRNA样品中的RNA和RNA.mRNA样品的多基因家族中用于鉴定同源片段的方法是保守的，这是一种在靶标中诱变的方法
4. Control primer annealing to improve the specificity of annealing in nucleic acid amplification, kit, methods for amplifying nucleic acid sequences of DNA and sequence of target nucleic acid or a mixture of nucleic acids, to detect the complementari Dade of DNA to mRNA differentially expressed in two or more samples of nucleic acid.To amplify a fragment of the cDNA target quickly, to amplify a population of cDNAs of filament double full-length complementary to mRNAs cDNAs, and filament double fortified with 5 'complementary to mRNAs to amplify rather than a sequence of nucleotide al VO at the same time, to produce a digital printing gDNA DNA, and RNA in a sample of mRNA.To identify segments of homology is conserved in a multigene family from a sample of mRNA, to identify a variation of nucleotide in a target nucleic acid, for mutagenesis in a target nucleic acid, and use of the initiator [P] . BRPI0214741B1 . 2015-05-12

机译：控制引物退火以改善核酸扩增中退火的特异性，试剂盒，扩增DNA核酸序列和靶核酸序列或核酸混合物的方法，检测DNA与mRNA互补表达的互补性（两种）或更多核酸样品。要快速扩增cDNA靶标的片段，以扩增与mRNA cDNA互补的长丝两倍全长的cDNA群体，并用与mRNA互补的5'双重修饰的长丝进行扩增而不是序列同时鉴定一个核苷酸的VO片段，以产生一个数字印刷的gDNA DNA和一个mRNA样品中的RNA。从一个mRNA样品中鉴定一个多基因家族中的同源片段是保守的，以鉴定一个核苷酸中一个核苷酸的变异。靶核酸，用于在靶核酸中诱变，以及引发剂的用途
5. A method for producing a to a ribonucleic acid (rna) - molecule complementary deoxyribonucleic acid (dna) - strand (cdna - strand), as well as the use of the method for the analysis of rna - molecules [P] . 德国专利： DE4319468C1 . 1994-11-17

机译：一种产生核糖核酸（rna）-分子互补脱氧核糖核酸（dna）-链（cdna-链）的方法，以及该方法在分析rna-分子中的用途