毒力减弱的NSP4突变基因、重组质粒与重组牛轮状病毒

摘要

本发明公开了一种毒力减弱的NSP4突变基因，其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了一种包含该毒力减弱的NSP4突变基因的重组质粒，还公开了一种包含该毒力减弱的NSP4突变基因的重组牛轮状病毒，构建方法为：将重组质粒与pcDNA3.1-T7RNAP重组质粒共转染恒河猴肾细胞MA104，然后接种野生型牛轮状病毒，利用反向遗传技术拯救变异病毒，即得毒力减弱的重组牛轮状病毒。本发明的重组牛轮状病毒，为国内外首次利用反向遗传技术获得的毒力减弱的BRV病毒株，与传统获得减毒株方法比较，本发明利用反向遗传技术并结合RNA干涉方法，成功获得毒力减弱的牛轮状病毒，为BRV减毒疫苗侯选株的获得提供了快捷途径。