NOX4敲减的A375稳转细胞株及其构建方法

摘要

本发明属于医学分子生物学领域。本发明所述的NOX4敲减的A375稳转细胞株是利用逆转录病毒载体pSuper.retro.puro将模板DNA双链中的F链5'-GATCCCCGGGCTAGGATTGTGTCTAAGCTTCAAGAGAGCTTAGACACAATCCTAGCCCTTTTTA-3'和R链5'-AGCTTAAAAAGGGCTAGGATTGTGTCTAAGCTCTCTTGAAGCTTAGACACAATCCTAGCCCGGG-3'插入进A375细胞基因组，经转录后生成的干扰RNA靶向降解A375细胞内源性NOX4mRNA，靶向沉默内源性NOX4表达，进而靶向敲减A375细胞内源性NOX4表达80%以上的稳转细胞株。