DNAzyme和三向结介导的等温扩增反应用于位点特异性m6A的检测

摘要

本发明涉及一种对特定位点m6A甲基化修饰定量检测方法，尤其涉及一种新型m6A敏感DNAzyme和三向结介导的等温指数CRISPR反应。本发明通过DNAzyme的结合臂定位特定的核酸序列，并利用其核心结构选择性地切割未修饰的腺嘌呤，而并不切割甲基化的腺嘌呤。联合等温扩增反应(SDA与EXPAR)和CRISPR Cas体系进行信号放大和实时荧光监测。本发明检测过程特异性高，快速灵敏，操作简单，成本低廉，不需要大型精密仪器的使用，能够直接检测m6A修饰比例，在基础研究和临床检测中具有良好的应用前景。