连接反应介导的等位基因特异性扩增-微流控芯片电泳法同时检测多个SNP位点

摘要

通常，一个基因上有多个双等位基因SNP位点与蛋白功能相关，为了同时测定这些SNP位点，已建立了多种基于多重PCR扩增的方法．这些技术优化过程繁琐，不宜作为普通实验室的通用方法．我们建立了一种基于适配器连接介导的等位基因特异性扩增的多重SNP测定方法（Adapter Ligationmediated Allele-specific Amplification，简称ALM-ASA法），即通过n＋1条引物进行n重PCR扩增，与我们自行设计和研制的体积小、操作简便且成本低的微流控分析系统相结合，简化了测定步骤和优化过程，提高了检测通量，降低了检测成本，不需特殊仪器即可实现．由于细胞色素P450 2D6（CYP2D6）是体内最重要的肝药酶之一，参与30多种常用药物代谢，是药物基因组学的主要研究基因之一，本文以CYP2D6基因中的6个SNP位点为测定对象，开展多个SNP位点同时测定的方法学研究．