含有增强子Hr3和启动子IE1的转基因干扰载体及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及家蚕的转基因技术，主要为增强子Hr3和启动子IE1在制备转基因干扰载体中的联合应用；转基因干扰载体的基础载体为转座载体pBac[3×P3-EGFPafm]，依次含有增强子Hr3、IE1基因启动子、目的基因正向片段、家蚕肌动蛋白Actin3(A3)内含子、目的基因反向片段和终止信号序列SV40；运用本技术，BmNPV病毒一旦侵染进入家蚕细胞就会受到抑制；本发明巧妙的利用IE1启动子和增强子Hr3的组合，使转基因家蚕在正常情况下表达适量的dsRNA；当BmNPV侵染家蚕后，利用病毒增殖产生的IE1蛋白激活Hr3增强子来大量表达dsRNA，使靶标基因dsRNA的表达量随着病毒量的增加而增加，最大程度减少表达dsRNA对家蚕正常生理活动的影响，并显著提高家蚕的抗性。