一种稳定表达荧光素酶及人CD20敲除鼠CD20的小鼠B细胞淋巴瘤细胞系构建方法

摘要

本发明涉及稳定表达荧光素酶及人源CD20的小鼠B细胞淋巴瘤A20‑hCD20(Tg)‑mCD20(KO)‑Luciferase细胞系构建方法。该细胞系利用电转将带有Luciferase荧光素酶及人CD20基因的转基因质粒和鼠CD20基因敲除的sgRNA共转A20细胞系，得到稳定表达人CD20及荧光素酶同时敲除细胞系自身鼠源CD20基因的A20细胞系。通过转基因质粒上Neo抗性元件进行筛选，获得能稳定传代的单克隆，实现了荧光素酶及人CD20基因稳定表达，鼠CD20基因敲除。本发明的细胞株为CD20为靶点的药物的小鼠体内药效评估提供了可测量及可视化的模型。