一种表达猪小肠抗菌肽PF1基因的重组乳酸克鲁维酵母及构建方法

摘要

本发明公开了一种表达猪小肠抗菌肽PF1基因的重组乳酸克鲁维酵母的构建方法，包括以下步骤：首先按乳酸克鲁维酵母密码子优化合成的猪小肠抗菌肽PF1基因；将猪小肠抗菌肽PF1基因与乳酸克鲁维酵母质粒pKLAC2同时双酶切反应、琼脂糖凝胶电泳回收，并进行4℃过夜连接，将连接产物转化大肠杆菌JM109，提重组质粒PF1‑pKLAC2；使用限制性内切酶SacII线性化处理重组质粒；再将线性化重组质粒转化乳酸克鲁维酵母GG799,得到重组乳酸克鲁维酵母PF1‑pKLAC2‑GG799。本发明使用乳酸克鲁维酵母对猪小肠抗菌肽PF1进行表达，同时表达产物分泌胞外，降低了后续的分离纯化成本。