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一种结合酶与超声处理由带内种皮核桃仁中提取多酚物质的方法

摘要

本发明涉及一种结合酶与超声处理由带内种皮核桃仁中提取多酚物质的方法,所述方法包括得到带种皮的核桃仁;然后以体积比1:3~1:15将带内种皮核桃仁投入到乙醇水溶液中,然后用食品级柠檬酸或盐酸将混合物的pH调整为3.5~6.5,然后加入果胶酶和/或纤维素酶复合物,得到多酚提取体系。根据本发明方法制备得到的核桃多酚粗提物,经冷冻干燥后其干物质总重量占原带皮核桃仁的2%以上,核桃多酚粗提物中多酚类有效物含量则达到15%以上。此外,还可采用大孔吸附树脂和工业色谱对得到的核桃多酚粗提物进行进一步分离,制备鞣花酸、水解单宁、胡桃醌等产品。

著录项

  • 公开/公告号CN106805180A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2017-06-09

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 江南大学;

    申请/专利号CN201710025261.2

  • 申请日2017-01-13

  • 分类号A23L25/00(20160101);A23L33/105(20160101);A23L5/30(20160101);C11B1/10(20060101);

  • 代理机构11305 北京君智知识产权代理事务所(普通合伙);

  • 代理人邢大文

  • 地址 214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号

  • 入库时间 2023-06-19 02:27:27

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2020-08-07

    授权

    授权

  • 2017-07-04

    实质审查的生效 IPC(主分类):A23L25/00 申请日:20170113

    实质审查的生效

  • 2017-06-09

    公开

    公开

说明书

【技术领域】

本发明属于油料作物加工技术领域。更具体地,本发明涉及一种结合酶与超声处理由带内种皮核桃仁中提取多酚物质的方法,还涉及根据所述方法得到的核桃多酚粗提物的应用。

【背景技术】

核桃(Juglans regiaL.)又名胡桃、弟桃,是胡桃科胡桃属植物,位居“四大干果”之首,是一种药食兼备的优良经济作物。核桃仁富含油脂、蛋白质及维生素等营养成份,并具有健胃、补血、润肺、益肾和补脑等多种功效,是一种很好的滋补品,营养丰富而味美,故又有“万岁子”、“长寿果”、“益智果”、“美容果”的美誉。现代研究表明核桃仁的抗氧化、防衰老和预防心血管疾病等多重功效主要归功于核桃仁中丰富的油脂、蛋白质和多酚类物质。核桃仁含油量很高,一般为40~65%,有的高达80%,核桃油脂肪酸组成中亚油酸约占61%,油酸约占23%,亚麻酸约占7.0%,同时含有ω-3和ω-6系列多不饱和脂肪酸使得其在降低血脂和血清胆固醇方面具有显著的优势,是药用油或老人和婴幼儿营养油的良好选择。在国际市场上,核桃油同橄榄油一样都倍受消费者青睐,前景非常广阔。核桃蛋白18种氨基酸种类齐全,且人体所需的8种必需氨基酸含量合理,对人体有重要功能的谷氨酸、天冬氨酸、精氨酸含量较高,作为一种全价的营养蛋白,其可消化率达87.2%。核桃仁皮的主要成分是纤维素、果胶质、单宁和色素等。在核桃仁的皮与仁之间存在着果胶质,使得仁与皮之间结合的比较牢固,难于分开。研究表明,核桃仁中的单宁主要存在于表皮中(占总量的90%以上),是产生苦涩味及导致果实褐变的最主要原因。

目前,在核桃的开发利用中,碱液浸泡是主要的前处理手段。通过在一定温度下的碱液浸泡,核桃的皮与仁之间的果胶层先被溶解,然后整皮脱落,可被水流冲洗去除。碱液浸泡法的机理是:果胶质在碱液作用下会发生水解,一部分果胶被解聚,其在水中的溶解度得以提高;另一方面,果胶酸在碱的作用下转变成水溶性好的果胶酸钠等盐类。所以碱液浸泡可以较充分地去除果胶质,脱除核桃皮。然而该法的缺陷也非常明显。首先,核桃皮中大量有益的多酚类物质被碱液破坏或在脱皮过程中浪费掉;其次,部分核桃仁的形状不规则,带有皱褶的夹缝中的核桃皮往往无法彻底脱除;再次,尽管热碱液浸泡时间目前已经有所缩短(约10min),经过处理的核桃仁还是会发生蛋白质变性和流失等问题。吴世兰等(吴世兰,秦礼康,蒋成刚,张帅.核桃仁碱液去皮过程中营养功能成分动态变化.中国油脂,2013,38(2):84-87)对核桃仁碱液去皮过程中营养功能成分的变化进行了研究。结果表明:碱液去皮后,核桃仁的粗蛋白、粗脂肪含量分别减少了24.7%、4.1%;必需氨基酸评分(AAS)从1.82降低到1.28;核桃仁内种皮总酚和总黄酮含量分别下降81.7%和72.2%;核桃仁蛋白的溶解性也明显降低。去皮核桃仁在后续烘干过程中颜色变成暗黄色,且核桃仁油的酸值(KOH)和过氧化值增加(分别增加0.43mg/g、1.78mmol/kg)。碱液去皮工艺废水COD为17500~21100mg/L,远远超过了国家二级污水排放标准。

尽管有研究对碱液尝试过回收利用,但收益与成本比例并不高。宋浩等对核桃仁去衣液中黄酮的回收开展了研究(宋浩,赵声兰,陈朝银,李汝荣,张天财,武万兴,史丹丹.核桃仁去衣液中核桃黄酮的回收及抗氧化活性研究.食品工业科技,2015,36(6):94-98,103.),采用AB-8型大孔树脂分离和纯化核桃黄酮,结果表明AB-8树脂在优化的工艺条件下可回收81.73%~86.51%的核桃黄酮,产品纯度61.35%~74.16%。此法不仅周期较长,而且碱液中不稳定的其他多酚类物质也被浪费掉。

因此,改进核桃内种皮的处理方式,是实现核桃仁高效开发利用的主要着眼点之一。荣瑞芬等(荣瑞芬,历重先,刘雪峥,裴东,陈佳,王怡婷.核桃内种皮营养与功能成分初步分析研究.食品科学,2008,29(11):541-543.)对核桃内种皮营养与功能成分进行了分析研究,发现核桃内种皮中总酚和黄酮类分别为1.038g/100g和0.744g/100g,分别是仁中含量的12.51和1.78倍,表明核桃内种皮具有较高的营养和保健价值。Colaric等(Colaric M,Veberic R,Solar A,Hudina M,Stampar F.Phenolic Acids,Syringaldehyde,andJuglone in Fruits of Different Cultivars of Juglans regia L.Journal ofAgricultural and Food Chemistry,2005,53(16):6390-6396.)采用高效液相色谱分析了核桃及其内种皮中的酚酸(绿原酸、咖啡酸、香豆酸、阿魏酸、芥子酸、鞣花酸、丁香酸)、丁香醛及胡桃醌等酚类物质,结果表明丁香酸、胡桃醌、鞣花酸是核桃和内种皮中含量较高的物质,核桃中三者含量分别为33.83、11.75、5.90mg/100g,而核桃内种皮中三者含量则分别为1003.24、317.90、128.98mg/100g,均为核桃仁中20至30倍左右。万政敏等(万政敏,郝艳宾,杨春梅,齐建勋,赵丽芹,王克建.核桃仁种皮中的多酚类物质高压液相色谱分析.食品工业科技,2007,28(7):212-213,224.)采用高效液相色谱对核桃内种皮中的多酚类物质进行了分析研究。在核桃内种皮中检测到没食子酸、绿原酸、咖啡酸、对羟基苯甲酸、香豆酸和阿魏酸等17种酚酸类物质,含量最高的没食子酸达到146.2mg/100g干样,而在无种皮的核桃仁中只检测到7种酚酸类物质,其中没食子酸的含量仅为5.3mg/100g干样,与前述研究结论基本一致。

其中一种思路是将核桃内种皮与核桃仁分离开再分别加以利用。周晔等(周晔;王伟;裴东.一种核桃内种皮的脱除方法.CN201210552825.5)公开了一种核桃内种皮的脱除方法。该方法步骤如下:(1)将待处理的核桃浸渍于液氮中进行冷冻;(2)将处理后的核桃置于空气中,直至所述核桃的表面出现白霜;(3)将出现白霜的核桃仁置于维生素C的水溶液中进行复水处理;(4)将经复水后的核桃依次进行超声和震荡处理,然后经冲刷,得到脱除内种皮的核桃仁以及脱除的内种皮。该发明本质上是利用不同结构组成的物质热胀冷缩系数不同的原理,进而实现内种皮与核桃仁的分离。尽管该法相对环保、处理难度适中,但使用液氮耗费较大,且该法回收的内种皮中多酚流失严重(仅保留约28%的多酚物质)。王群学等(王群学,赵西周,贺跃东,梁少华,张富强.核桃仁连续脱皮的方法.CN201510261863.9)公布了一种核桃仁连续脱皮的方法。利用碱液浸泡和高压冲洗相结合对内种皮进行分离,但由于带皮核桃仁原料往往含有不少碎粒,高压冲击造成了很可观的核桃仁损失,且种皮中多酚也严重流失。康玮丽等对核桃仁去皮方法进行了优化研究(康玮丽,唐军虎,敬思群.核桃仁去皮方法优化.食品与发酵工业,2013,36(8):127-131),发现采用热风烘烤-微波联用法可去除核桃仁皮,优化工艺条件为:烘烤温度130℃,烘烤时间16min,微波功率769W,微波时间51s,核桃仁脱皮率为98.01%,核桃油过氧化值为1.65meq/kg。由于核桃油中亚麻酸比例较高,因此这一高强度热处理不仅会增加油脂过氧化值,还可能造成其它不利影响。

另一种思路是先对内种皮中多酚类物质进行提取,然后再开发利用核桃仁。早在1896年,Osborne和Campbell等(Osborne,T.B.;Campbell,G.F.Conglutin andvitellin.J.Am.Chem.Soc.,1896,18:609-623.)研究发现,用热水处理英国核桃可除去核桃内种皮,达到去除单宁的目的,同时也将脱脂核桃粉的球蛋白溶出率从原来的3.5%左右提高到20%。然而,单纯的热水浸泡,多酚提取效率不高且蛋白等损失也比较高。国内有些研究者以纯核桃仁内种皮为原料,研究了多酚的提取工艺。如魏静和郝利平(魏静,郝利平.核桃仁种皮中多酚的提取工艺研究.山西农业大学学报,2010,30(2):150-153.)研究了核桃仁种皮中多酚的提取工艺。通过对乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度等因素的探讨,确定较佳工艺条件为:60%乙醇、料液比1:8、提取时间30min、提取温度55℃,实现多酚的粗提得率571mg/g。但此粗提物的多酚类物质含量未见报道。张春梅等也以核桃内种皮为原料开展了多酚提取工艺的研究(张春梅,陈朝银,赵声兰,黄再强,樊启猛.核桃内种皮多酚提取工艺及其体外抗氧化活性的初步研究.中国酿造,2014,33(7):130-134.),确定核桃内种皮多酚的提取工艺条件为:乙醇体积分数45%、液固比60:1(mL/g)、提取温度70℃、提取时间60min。在此条件下,多酚得率为250.5mg/g。王莉等(王莉,赵新亮,董文,贺志龙,李佳,马亚茹.核桃仁种皮中类黄酮提取工艺的比较.食品与发酵科技,2013,49(4):90-92.)也以核桃仁种皮为原料,比较了其中类黄酮的提取工艺,得出提取类黄酮的优化条件为:水浴温度65℃,乙醇浓度60%,提取时间为1.5h,固液比为1∶30。上述研究对多酚类物质的提取有参考价值,但由于需要先分离出核桃仁内种皮,在实际应用时受到很大限制。

其他一些新型提取技术也被应用于核桃仁加工上。正如郜海燕等(郜海燕,李兴飞,陈杭君,房祥军.山核桃多酚物质提取及抗氧化研究进展.食品科学,2011,32(05):336-341)指出的,微波萃取技术和超临界萃取技术在山核桃油的提取上已经达到可应用的程度,但由于多酚类物质含量相对较低以及微波处理导致的局部温升等不利因素的限制,这些技术应用于核桃多酚物质提取还不成熟。

考虑到核桃仁中多酚主要分布在内种皮上,而内种皮的物理分离还难以工业化实现,本发明人提出一种结合酶与超声处理由核桃仁中提取多酚物质的方法,在适宜的条件下,结合乙醇溶液和果胶酶和/或纤维素酶复合物的作用,利用超声处理强化传质过程,实现对完整核桃仁的多酚物质的高效提取。所得多酚提取液可进一步分离精制,作为抗氧化剂用于膳食补充剂、饮料、果蔬产品及休闲食品;提取多酚后的核桃仁可粉碎制取高品质核桃油和低脂核桃粉,兼顾了核桃仁中主要的组分和活性成分,对核桃综合利用具有重要参考价值。

【发明内容】

[要解决的技术问题]

本发明的目的是提供一种结合酶与超声处理由带内种皮核桃仁中提取多酚物质的方法。

[技术方案]

本发明以带内种皮的核桃仁为原料,在果胶酶和/或纤维素酶的辅助下,结合超声处理,采用乙醇溶液将核桃仁内种皮中的多酚类物质高效提取出来,经过滤分离得到多酚粗提物和脱酚核桃仁产品。

本发明是通过下述技术方案实现的。

本发明涉及一种由带内种皮核桃仁提取核桃多酚的方法,所述方法包括下述步骤:

(1)得到带种皮的核桃仁

对核桃进行脱壳和清理除杂,然后不经破碎处理即可得到带内种皮核桃仁。

在本发明中,所述的核桃仁可以是由核桃剥壳机或手工剥壳获得的带内种皮核桃仁,也可以是市售的带内种皮核桃仁,这是最常见的核桃仁产品。

带内种皮核桃仁不经过破碎处理可以降低后继联合脱酚处理的溶液消耗,同时降低蛋白等的溶出,既有利于提高多酚粗提物的纯度,也对脱酚核桃仁产品的品质有利。

(2)制备多酚提取体系

按照以g计带内种皮核桃仁的质量与以mL计乙醇水溶液的体积之比1:3~1:15的比例,将步骤(1)得到的带内种皮核桃仁投入到乙醇水溶液中。其中,乙醇水溶液的体积浓度是0~20%,然后用食品级柠檬酸或盐酸将混合物的pH调整为3.5~6.5,接着在温度10~60℃条件下向所述混合物中加入果胶酶和/或纤维素酶复合物,酶用量为0.01~10.0U/g核桃仁,从而得到多酚提取体系。

本发明所述的多酚提取体系的准备,是充分考虑乙醇在浸提中对溶液极性和介电系数的影响、乙醇浓度和pH对酶活的影响、果胶酶和/或纤维素酶对内种皮细胞的破坏及多酚的释放效果而综合确定的。在该条件下,醇溶液与果胶酶和/或纤维素酶等因素有效发挥协同作用,实现核桃内种皮中多酚类物质的充分释放。

其中,以g计带内种皮核桃仁的质量与以mL计乙醇水溶液的体积之比为1:3~1:15,优选地1:5~1:10。

乙醇水溶液的体积浓度是0~20%,如果其体积浓度高于20%,会造成纤维素酶和果胶酶的失活。优选地,乙醇水溶液体积浓度为5~15%。当乙醇水溶液的体积浓度为0%时,提取时间需要适当延长。

在本发明方法中,使用食品级柠檬酸或盐酸将带内种皮核桃仁与含有乙醇的水溶液的混合物的pH调整为3.5~6.5。之所以使用柠檬酸或盐酸,是由于二者经济性好,且对产品风味无不良影响。当然,也可以使用柠檬酸或盐酸混合物调整pH。所述混合物的pH为3.5~6.5,是为了满足酶的最适pH的要求,pH值或高或低都不利于酶的高效作用。优选地,所述混合物的pH为4.8~6.0。

所述酶是含有聚半乳糖醛酸酶活力的果胶酶和/或纤维素复合酶,即可以使用果胶酶或纤维素复合酶,也可以使用果胶酶与纤维素复合酶的复合物;当使用的酶是果胶酶与纤维素复合酶的复合物时,二者的比例是任选的。聚半乳糖醛酸酶活力是指单位时间内水解果胶聚半乳糖醛酸主链的能力。果胶酶和纤维素复合酶都是本技术领域的技术人员熟知的,也是目前市场上销售的产品,果胶酶例如是由诺维信公司生产销售的SMASH,纤维素酶例如由天野酶制剂有限公司生产销售的Cellulase AP3、由诺维信公司生产销售的Cellic CTec2。

在本发明方法中,酶的用量是以核桃仁的重量计0.01~10.0U/g核桃仁。如果酶的用量低于0.01U/g核桃仁,会造成提取效率的下降和提取时间的延长;如果高于10.0U/g核桃仁,则会造成成本过高,甚至内种皮的脱落。

(3)超声处理

在超声功率0.2~20W/g核桃仁的条件下,对步骤(2)得到的多酚提取体系进行超声处理10~120min,提取多酚类物质。

本发明中,超声物理场辅助提取的作用主要是强化酶对核桃仁内种皮相关底物的作用,实现对多酚类物质的高效释放。发明人经过多次试验,确定超声功率0.2~20W/g核桃仁、超声处理时间10~120min是合适的。在所用功率较高的情况下,时间可以适当缩短,但中等功率结合适当延长的时间对多酚类的提取效果更好。

(4)分离回收

对步骤(3)超声处理后的多酚提取体系进行固液分离,分别回收脱酚核桃仁和核桃多酚浸提液。

本发明中的固液分离可以是简单的过滤或沉降式离心等,由于核桃仁颗粒未破碎,个体较大,可以显著提高分离效率。

所得脱酚核桃仁即可作为脱苦味(因单宁绝大部分被去除)核桃仁直接消费,也可以作为加工核桃油和核桃蛋白粉的原料。特别地,在本实验室已经建立了以该脱酚核桃仁为原料通过水媒法(以水为主要媒介)联产原香核桃油和核桃蛋白粉的技术,实现核桃仁的高效综合开发利用。

所得的核桃多酚浸提液含有一定量乙醇,可以根据生产需要对其进行蒸馏回收使用。

特别地,上述步骤(2)~(4)可重复1~4次以达到更好的提取效果。

(5)精制

步骤(4)得到的核桃多酚浸提液经过真空旋转蒸发除去乙醇,接着浓缩,然后经真空冷冻干燥脱除水分,得到核桃多酚粗提物。

多酚粗提物可直接真空浓缩后经真空冷冻干燥得到粉末产品。本发明方法中使用的真空浓缩和真空冷冻干燥都是本技术领域的技术人员所熟知的方法。真空浓缩例如在-1~-20kPa压力与20~50℃温度下进行。

根据本发明方法制备得到的核桃多酚粗提物,经冷冻干燥后其干物质总重量占原带皮核桃仁的2%以上,核桃多酚粗提物中多酚类有效物含量则达到15%以上。

此外,还可采用大孔吸附树脂和工业色谱对得到的核桃多酚粗提物进行进一步分离,制备鞣花酸、水解单宁、胡桃醌等产品。

核桃多酚粗提物的UPLC-PDA-MS/MS分析结果见附图2。采用Waters公司的UPLC系统,色谱条件如下:Gemini C18色谱柱;柱温35℃;流动相A:纯乙腈;流动相B:1%的甲酸水溶液;流速0.3mL/min;梯度洗脱:0~0.1min/2%~2%A;0.1~18min/2%~30%A;18~20min/30%~50%A;20~25min/50%~100%A;25~27min/100%~100%A。质谱采用负离子扫描模式,数据通过Masslynx v4.1软件进行分析。

[有益效果]

与现有技术相比,本发明主要具有以下有益效果:

(1)从带内种皮核桃仁中直接提取种皮中的多酚类物质,脱酚效果与热碱液浸泡脱除法相当,所提取的多酚物质可开发利用,显著提升了本发明的经济价值;

(2)无需从核桃仁表面脱除内种皮,使得本发明技术成果应用便利性大幅改进;脱酚核桃仁的开发利用中,残留的内种皮对油脂提取、蛋白粉制备基本无不良影响。

(3)充分发挥生物酶处理和超声处理的作用特性,使得核桃多酚的提取效果和效率得到大幅的改进;

(4)本发明提出的方法可为其他食品功能因子的提取提供有益参考。

【附图说明】

图1:本发明方法的工艺流程

图2:本发明的核桃多酚粗提物的UPLC洗脱曲线;

其中,A为总粒子流图;B为紫外吸收(280nm)图。

【具体实施方式】

下面结合实施例对本发明做进一步的说明,但不限于实施例。

在本发明中,如无特殊说明,用于描述浓度的“%”均为重量百分比。

实施例1:本发明的核桃多酚粗提物的提取

称取市售的带内种皮核桃仁(碎仁率5%左右)1000g,按照以g计核桃仁的质量与以mL计乙醇水溶液的体积之比1:4的比例,将其与4L体积浓度为5%的乙醇溶液混合,以1M的盐酸调节体系pH至4.0,将体系温度升至55℃,按0.2U/g核桃仁的比例加入诺维信公司的果胶酶SMASH,将得到的多酚提取体系置于超声清洗机(如昆山舒美KQ-J2000GKDE高功率恒温超声波清洗器)中,按照超声功率0.25W/g核桃仁的比例调节超声功率250W,超声处理120min,而后纱布过滤分别回收脱酚核桃仁和核桃多酚粗提液。将得到的脱酚核桃仁采用与上述相同的条件再次浸提,再次回收脱酚核桃仁和核桃多酚粗提液。合并两次所得粗提液,真空旋转蒸发除去乙醇后浓缩至适当浓度,而后经真空冷冻干燥脱除水分,得到21.6g核桃多酚粗提物粉末。经UPLC分析,其酚酸和黄酮等有效物占比17.0%。

实施例2:本发明的核桃多酚粗提物的提取

将市售新疆纸皮核桃剥壳,得到核桃仁200g(碎仁率2%左右),按照以g计核桃仁的质量与以mL计乙醇水溶液的体积之比1:15的比例,将其与3L的体积浓度为20%的乙醇溶液混合,以1M的柠檬酸调节体系pH至6.0,将体系温度升至40℃,按5U/g核桃仁的比例加入诺维信公司的纤维素酶Cellic CTec2,将混合体系放置于超声清洗机中,按照超声功率10W/g核桃仁的比例调节超声功率2000W,超声处理20min,而后布氏漏斗过滤,分别回收核桃仁和浸提液。将浸提液真空旋转蒸发除去乙醇后浓缩至适当浓度,而后经真空冷冻干燥脱除水分,得到4.76g核桃多酚粗提物粉末。经UPLC分析,其酚酸和黄酮等有效物占比15.4%。

实施例3:本发明的核桃多酚粗提物的提取

按照以g计核桃仁的质量与以mL计乙醇水溶液的体积之比1:10的比例,将市售带内种皮核桃仁(碎仁率10%左右)500g与5L体积浓度为10%的乙醇溶液混合,以1M的柠檬酸调节体系pH至4.5,将体系温度升至50℃,分别按0.1U/g、0.2U/g核桃仁的比例加入诺维信公司的复合酶SMASH和Max,将混合体系置于超声清洗机中,按照超声功率2W/g核桃仁的比例调节超声功率1000W,超声处理30min,而后纱布过滤分别回收核桃仁和浸提液。将核桃仁采用与上述相同的条件重复浸提2次,回收脱酚核桃仁和浸提液。合并三次所得浸提液,真空旋转蒸发除去乙醇后浓缩至适当浓度,而后经真空冷冻干燥脱除水分,得到11.4g核桃多酚粗提物粉末。UPLC分析显示其酚酸和黄酮等有效物占比17.6%。

实施例4:本发明的核桃多酚粗提物的提取

按照以g计核桃仁的质量与以mL计乙醇水溶液的体积之比1:3的比例,将市售带内种皮核桃仁(碎仁率10%左右)50g与0.15L体积浓度为0%的乙醇溶液(即纯水)混合,以1M的柠檬酸调节体系pH至3.5,将体系温度升至60℃,按10U/g核桃仁的比例加入诺维信公司的果胶酶SMASH,将混合体系置于超声清洗机中,按照超声功率20W/g核桃仁的比例调节超声功率1000W,超声处理10min,而后纱布过滤分别回收核桃仁和浸提液。将核桃仁采用与上述相同的条件重复浸提2次,回收脱酚核桃仁和浸提液。合并三次所得浸提液,真空旋转蒸发除去乙醇后浓缩至适当浓度,而后经真空冷冻干燥脱除水分,得到1.22g核桃多酚粗提物粉末。UPLC分析显示其酚酸和黄酮等有效物占比15.2%。

实施例5:本发明的核桃多酚粗提物的提取

将市售新疆纸皮核桃剥壳,得到核桃仁200g(碎仁率2%左右),按照以g计核桃仁的质量与以mL计乙醇水溶液的体积之比1:8的比例,将其与1.6L的体积浓度为15%的乙醇溶液混合,以1M的柠檬酸调节体系pH至6.5,将体系温度升至10℃,按0.01U/g核桃仁的比例加入诺维信公司的纤维素酶Cellic CTec2,将混合体系放置于超声清洗机中,按照超声功率0.2W/g核桃仁的比例调节超声功率40W,超声处理120min,而后布氏漏斗过滤,分别回收核桃仁和浸提液。将浸提液真空旋转蒸发除去乙醇后浓缩至适当浓度,而后经真空冷冻干燥脱除水分,得到4.68g核桃多酚粗提物粉末。经UPLC分析,其酚酸和黄酮等有效物占比15.5%。

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