一种利用环糊精葡萄糖基转移酶转糖基反应提高染料木素水溶性的方法

摘要

本发明公开了一种利用环糊精葡萄糖基转移酶转糖基反应提高染料木素水溶性的方法，属于酶工程领域。本发明将来源于P.macerans strain JFB05‑01(CCTCC NO:M208063)的环糊精葡萄糖基转移酶密码子优化后的基因(GenBank accession no.JX412224)连接至pET20b(+)质粒上，并转入E.coli BL21(DE3)细胞中构建产环糊精葡萄糖基转移酶的基因工程菌。通过发酵产酶并纯化后，获得较纯的环糊精葡萄糖基转移酶用于催化转糖基反应，并以α‑环糊精作为糖基供体，染料木素作为糖基受体，最终获得至少四种染料木素糖基化衍生物(Glc)n‑genistein(n＝1,2,3,4)。其中Glc‑genistein和(Glc)2‑genistein为主要产物，特别是(Glc)2‑genistein，其水溶性较染料木素有较大幅度提高。