一种山香圆叶提取物及其应用

摘要

本发明涉及一种山香圆叶提取物，由如下方法提取得到：1)在超声波的作用下，利用纤维素酶对含有山香圆叶粉末的水溶液进行酶解，对酶解液离心后，收集上清液；2)将所述上清液浓缩后调节其中乙醇的浓度为75～85％，低温静置，离心收集二次上清液，浓缩至去除所述二次上清液中的乙醇，得山香圆叶提取物。本发明所述的山香原叶提取物的提取方法简单，成本低，且其具有降血脂的功效，可制备成降血脂的药物组合物，应用前景广阔。

说明书

技术领域

本发明涉及降血脂药物领域，尤其涉及一种山香圆叶的提取物。

背景技术

高血脂症是指血脂水平过高，是引起冠心病、动脉粥样硬化等严重危害人体健康疾病的重要危险因素之一，随着人们生活水平的提高和生活习惯的改变，该病的发病率明显增加，发病的年龄也有所提前，每年因为高血脂症导致生命终止的人数也在增加，研究有效方法预防和治疗高血脂的发生具有重要意义。目前在临床上常用的口服降血脂药物以他汀类(辛伐他汀、美伐他汀、普伐他汀等)、烟酸类(烟肌酯、阿昔莫司等)、贝特类(苯扎贝特、吉非罗齐、非诺贝特等)等西药为主。这些药物长期使用时或效果不佳，或有较严重的副作用，如对肝肾造成较大的伤害、产生严重的胃肠道反应等。而天然植物提取物，具有多靶点和多成分协同作用的优点，而且安全性高，无毒副作用，易于被消费者接受，尤其适宜那些血脂偏高但尚未达到用药程度的亚健康群体。因此，从天然药物中筛选可防治高血脂症的药物，日益受到关注。

山香圆叶为省沽油科植物山香圆(Turpinia arguta Seem.)的干燥叶。夏、秋二季叶茂盛时采收，除去杂质，晒干。味苦，寒。归肺、肝经。清热解毒，利咽消肿，活血止痛。用于乳蛾喉痹，咽喉肿痛，疮疡肿毒，跌扑伤痛。在我国，主产于江西、福建、广东、广西等省。民间用鲜叶水煎内服治疗扁桃体炎、咽喉炎，预防感冒，或鲜叶捣烂外敷治疗疮疥，均有显著疗效。现代药理研究表明，山香圆具有抗菌、抗炎、镇痛以及调节免疫作用。

发明内容

针对现有技术中化学类的降血脂药物存在毒副作用大的缺陷，本发明提出一种具有降血脂功效的山香圆叶提取物。

本发明所述的提取物，由如下方法提取得到，

1)在超声波的作用下，利用纤维素酶对含有山香圆叶粉末的水溶液进行酶解，对酶解液离心，收集上清液；

2)调节所述上清液中乙醇的浓度为75～85％，低温静置至不溶物完全析出，对出现不溶物的溶液再次进行离心，收集二次上清液，去除所述二次上清液中的乙醇，得山香圆叶提取物。

本发明所述的山香圆叶粉末为山香原叶干燥果穗药材制备成的粉末，其粒度为60～80目。

本发明所使用的纤维素酶为β-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶。

优选的，所述超声波的功率为200～300w。

优选的，所述酶解过程中，控制水和山香圆叶粉末的液料比为30～40ml/g，纤维素酶的添加量为所述水的质量的3.5～4.0％，酶解时间为30～40min，温度为25～35℃。

优选的，所述步骤2)中，在调节所述上清液中乙醇的浓度之前，需先将所述上清液调节至生药量为0.5～1g/ml。

优选的，所述步骤2)中，调节乙醇的浓度为80％。

优选的，所述低温静置过程中，控制温度为2～6℃，时间为12～24h。

优选的，所述步骤2)中去除乙醇的具体操作为将上清液在50～60℃进行真空旋转蒸发浓缩。

优选的，所述步骤1)和步骤2)的离心操作中，控制转速4000～5000r/min，时间10～15min。

本发明的最后一个目的是保护包括本发明所述山香圆叶提取物在制备降血脂药物方面的应用。

本发明所述的提取物具有如下有益效果：

1、本发明不仅利用酶解技术破坏山香圆叶细胞壁促进细胞内有效成分的充分溶出，而且利用低功率超声波振动，低温提取，在降低活性成分结构破坏风险的同时促进溶出、节省提取时间、降低能量成本；

2、本发明所述的山香圆叶水提醇沉上清液可作为活性成分，具有良好的防治高血脂症的作用，可发展作为天然降血脂保健品用途。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不能用来限制本发明的范围。

实施例1

本实施例涉及本发明所述的山香圆叶提取物，其提取方法包括如下步骤：

1)将唇形科植物山香圆叶(Turpiniae Folium)的干燥果穗药材粉碎至60～80目，得到的山香圆叶粉末，将水与山香圆叶粉末按30:1质量比的料液比混合，在其中添加为所述水溶液质量3.5％的纤维素酶，在200W的超声波功率和35℃温度下进行30min提取，提取后再以5000r/min进行离心，10min后收集上清液A；

2)将步骤(1)的上清液A浓缩至干药量为0.5g/ml，在浓缩产物中加入其体积4倍的无水乙醇溶液混匀，当其溶液中乙醇浓度为80％时，于4℃下静置12h，再以5000转/min进行离心，10min后收集上清液，浓缩至无醇味，即得山香圆叶提取物。

实施例2

本实施例涉及本发明所述的山香原叶提取物，其提取方法包括如下步骤：

1)将唇形科植物山香圆叶(Turpiniae Folium)的干燥果穗药材粉碎至60～80目，得到的山香圆叶粉末，将水与山香原叶粉末按40:1的料液比混合，在其中添加为所述水溶液质量4.0％的纤维素酶，在300W的超声波功率和25℃温度下进行40min提取，提取后再以4000r/min进行离心，15min后收集上清液A；

2)将步骤(1)的上清液A浓缩至干药量为0.8g/ml，在浓缩产物中加入其体积3倍的无水乙醇溶液混匀，当其溶液中乙醇浓度为85％时，于2℃下静置24h，再以5000转/min进行离心，10min后收集上清液，浓缩至无醇味，即得山香圆叶提取物。

实施例3

本实施例涉及本发明所述的山香原叶提取物，其提取方法包括如下步骤：

1)将唇形科植物山香圆叶(Turpiniae Folium)的干燥果穗药材粉碎至60～80目，得到的山香圆叶粉末，将水与山香圆叶粉末按35:1的料液比混合，在其中添加为所述水溶液质量3.75％的纤维素酶，在250W的超声波功率和30℃温度下进行35min提取，提取后再以4000r/min进行离心，15min后收集上清液A；

2)将步骤(1)的上清液A浓缩至干药量为1g/ml，在浓缩产物中加入其体积3倍的无水乙醇溶液混匀，当其溶液中乙醇浓度为75％时，于2℃下静置24h，再以5000转/min进行离心，10min后收集上清液，浓缩至无醇味，即得山香圆叶提取物。

试验例1

(1)实验材料

阳性对照药：非诺贝特片(批号：20150903)。果糖：山东西王糖业有限公司(批号：201504133)。

5周龄雄性SD大鼠36只，体重180±20g，SPF级，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供。许可证号：SCXK(湘)2014-0002。

基础饲料购于湖南斯莱克景达实验动物有限公司。饲料生产配方：玉米20％，豆粕18％，小麦38％，鱼粉10％，麸皮5％，豆油3％，麦芽糊精2％，预混料4％。

(2)试验方法

高血脂模型法—预防性给药

在实验环境下大鼠喂饲基础饲料观察7d，进行随机分组，每天给予定量的基础饲料，正常组给予定量的蒸馏水，模型组给予相同体积的20％果糖水同时灌胃2mL生理盐水，阳性对照组给予相同体积的20％果糖水的同时灌胃阳性药物(50mg/kg/d)，实验组给予相同体积的20％果糖水的同时灌胃实施例1中山香圆叶水提醇沉上清液(含生药量2.5g/kg/d)，灌胃体积10mL/kg，每周定期称量体重，于56天实验结束时禁食不禁水16小时，取血，离心(3000r/10min)分离血清。测定血清TC、TG、HDL-C血脂水平。

两组数据采用T检验，多组数据采用ANOVA统计处理。数据以均数±标准误表示，P<0.05表示显著差异。

(3)实验结果

表1大鼠预防性给药降血脂实验体重变化情况(n＝9)

与模型组相比aP<0.05，bP<0.01。

由表1数据可以得出：经过56天的实验结束后，模型组大鼠的终末体质量、给药后体质量增

长量显著高于高于正常组(P<0.01)，山香圆叶水提醇沉上清液组终末体质量、给药后体质量增长量显著低于模型组(P<0.01)。

表2大鼠预防性给药降血脂实验血脂指标情况(n＝9)

与模型组相比^aP<0.05，^bP<0.01。

由表2数据可以得出：经过56天的实验结束后，模型组大鼠的TC含量显著高于正常组(p﹤0.01)，模型组大鼠的TG含量显著高于正常组(p﹤0.01)，模型组大鼠的HDL-cho含量显著高于正常组(p﹤0.01)，说明成功的建立了高血脂大鼠模型；山香圆叶水提醇沉上清液组TC(p﹤0.01)、HDL-cho(p﹤0.05)含量均显著低于模型组，TG含量均低于模型组，但无统计学意义。说明山香圆叶水提醇沉上清液具有一定的降低高血脂作用。

大鼠的预防性降血脂实验结果分析表明：山香圆叶水提醇沉上清液能够显著的抑制大鼠的TC和HDL-cho水平的升高，显著降低体重，有利于血脂的控制和预防动脉粥样硬化；这对于降低心脑血管疾病的发生率有重要意义。因此，利用山香圆叶开发具有降血脂作用的食品、保健食品及药品具有良好的前景。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。