公开/公告号CN102706820A
专利类型发明专利
公开/公告日2012-10-03
原文格式PDF
申请/专利权人 杭州市农业科学研究院;
申请/专利号CN201210190596.7
申请日2012-06-12
分类号G01N21/31(20060101);
代理机构33200 杭州求是专利事务所有限公司;
代理人周烽
地址 310024 浙江省杭州市转塘镇杭新路东1号
入库时间 2023-12-18 06:42:37
法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2014-10-01
授权
授权
2012-11-28
实质审查的生效 IPC(主分类):G01N21/31 申请日:20120612
实质审查的生效
2012-10-03
公开
公开
技术领域
本发明涉及一种食品检测技术,尤其涉及一种鸡蛋蛋黄中类胡萝卜素的定性检测方法。
背景技术
通常认为,蛋黄的颜色越黄越深,蛋品的质量就越好。蛋黄中的呈色物质为类胡萝卜素,来源于饲料玉米、干草所含的天然叶黄素、玉米黄质。目前规模养殖中,因日粮配制较单一,玉米新鲜度低等因素,日粮中类胡萝卜素含量低,蛋黄色泽呈淡黄色,明显影响销售。在蛋鸡日粮中添加着色剂,能明显改善蛋黄色泽。目前着色剂主要有二类,一是玉米、万寿菊等植物提取物,其成分是叶黄素及其酯,呈黄色,添加后蛋黄不可能产生令人喜爱的橙红色;二是着色效果较好的酮基类胡萝卜素,如角黄素、虾青素。虾青素,化学名为3,3’-二羟基-4,4’-二酮基-β,β’-胡萝卜素,属酮基类胡萝卜素或其酯,无论是藻类提取、化工合成物,均不允许用于家禽产品的着色。角黄素,又称斑蝥黄,化学名为4,4’-二酮基-β,β’-胡萝卜素,天然存在较少,在饲料产品中使用的多为化工合成。合成角黄素在我国允许使用,是目前用量最大的动物产品着色添加剂,但已经发现,人过多摄入时存在对视力的损伤风险。角黄素在国外限量使用,我国较多的地方性鸡蛋标准、有机食品生产上也明确规定不得使用。目前,凭蛋黄的表观色泽,很难区分蛋品中是否含合成酮基类胡萝卜素。类胡萝卜素的实验室分析,常用的AOAC法,用于测定样品中总类胡萝卜素浓度,不能区分类胡萝卜素的种类;高效液相色谱法,能对不同结构的类胡萝卜素进行定量检测,但设备等条件要求高,试剂成本高。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的不足,提供一种蛋黄中酮基类胡萝卜素的定性检测方法,用于判别蛋黄中是否含有合成角黄素、虾青素等酮基类胡萝卜素成分。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的:一种蛋黄中酮基类胡萝卜素的定性检测方法,包括以下步骤:
(1)一次抽样同一批次4-6枚测试蛋,将所有抽样的测试蛋分离出蛋黄、除去蛋黄膜,搅拌均匀;
(2)称取4-8 g步骤1搅拌均匀的蛋黄,放入100 ml具塞离心管,并加入无水乙醇50-60ml,200W超声波40℃水浴20-30min后,冷却至室温;
(3)3000r/min离心5min,分离出蛋黄提取液;
(4)残余蛋黄中加无水乙醇10ml振荡、3000r/min离心5min,分离出蛋黄提取液;
(5)重复1-2次步骤4;合并所有测试蛋品的蛋黄提取液,加无水硫酸钠10-15g吸去水分,以无水乙醇定溶至100ml;
(6)用紫外可见分光光度计进行光谱分析,扫描波长设为400-500nm,以无水乙醇为参比液,读取测试蛋品的蛋黄提取液的最大吸收波长λmax;
(7)若λmax大于450,则判断测试蛋的蛋黄中含有酮基类胡萝卜素。
本发明的有益效果是:本发明的方法测定样品蛋黄提取液λmax,与对照品λmax比较,二者间差值用于判别蛋黄中是否含有酮基类胡萝卜素。本发明设备条件要求低,试剂用量少,在生产上实用性较强。本发明能有效区分蛋品中是否含较高的酮基类胡萝卜素,如角黄素、虾青素等。
具体实施方式
本发明的原理是:与含天然色素蛋黄相比,含酮基类胡萝卜素蛋黄的有机溶剂提取液在400-500nm波长间的λmax会明显升高。
本发明蛋黄中酮基类胡萝卜素的定性检测方法,包括以下步骤:
1、一次抽样同一批次4-6枚测试蛋,将所有抽样的测试蛋分离出蛋黄、除去蛋黄膜,搅拌均匀。
2、称取4-8 g步骤1搅拌均匀的蛋黄,放入100 ml具塞离心管,并加入无水乙醇50-60ml,200W超声波40℃水浴20-30min后,冷却至室温。
3、3000r/min离心5min,分离出蛋黄提取液。
4、残余蛋黄中加无水乙醇10ml振荡、3000r/min离心5min,分离出蛋黄提取液。
5、重复1-2次步骤4;合并所有测试蛋品的蛋黄提取液,加无水硫酸钠10-15g吸去水分,以无水乙醇定溶至100ml。
6、用紫外可见分光光度计进行光谱分析,扫描波长设为400-500nm,以无水乙醇为参比液,读取测试蛋品的蛋黄提取液的最大吸收波长λmax。
7、若λmax大于450,判断测试蛋的蛋黄中含有酮基类胡萝卜素。
下面根据本发明对生产上常见的含酮基类胡萝卜素鸡蛋进行检测,以说明本发明的目的和效果。
实施例1
1 材料与方法
1.1 蛋鸡饲喂试验设计
试验鸡的品种为海兰商品蛋鸡,产蛋率85%。选取体重、生产性能基本一致的海兰商品蛋鸡960羽,设1个对照组与4个试验组,每组192羽。对照组饲喂基础日粮;试验组在基础日粮中分别添加角黄素、虾青素饲料添加剂,用量分别为2、4mg/kg日粮。角黄素、虾青素系商品型饲料添加剂,含量均为10%。
基础日粮的组成与配比为,玉米63%+豆粕20%+麸皮5%+石粉8%+复合预混料4%。日粮主要营养指标符合国家GB/T5916-2008标准要求。
试验鸡群同处一幢半开放式鸡舍,饲养条件基本一致,三层笼养,按常规生产进行管理。饲喂21天时每组取蛋品进行分析。
1.2 分析方法
每组各取30枚鲜蛋,分离出蛋黄,除去蛋黄膜,以每5枚蛋黄混合均匀,作为1个样本,每组6个样本。
精确称取蛋黄5±0.01g,加60ml无水乙醇,100W超声、40℃水浴中提取20min,冷却。倒出提取乙醇;沉淀用无水乙醇洗涤2次;合并上述乙醇提取液。在提取液中加无水硫酸钠15g吸水,收集上清液加入100ml棕色容量瓶,加无水乙醇定容。上述试剂均为分析纯,操作过程尽可能避光。
提取液在1cm比色杯中,用SP-756P型紫外可见分光光度计,以无水乙醇为参比,在400-500nm下扫描,读取大吸光度时的波长λmax。结果数据以X±SD表示。
2 试验结果
表1:各试验组蛋黄提取液的λmax测定值,单位:nm
由表1可见,对照组(不含酮基类胡萝卜素)的最大吸收波长λmax小于450.试验组蛋黄提取液的最大吸收波长明显高于对照组,均大于450,且随着角黄素、虾青素添加量增加,蛋黄提取液的吸收波长数值增大。
实施例2
1 材料与方法
1.1 饲喂试验设计
试验鸡的品种为海兰商品蛋鸡,产蛋率85%。选取体重、生产性能基本一致的海兰商品蛋鸡576羽,设A、B、C三个试验组,每组192羽。基础日粮相同;各组色素添加剂用量见表2。叶黄素添加剂为商品型,万寿菊提取物,类胡萝卜素标示量2.0%。角黄素、虾青素系商品型饲料添加剂,含量均为10%,同实施例1。
表2:色素添加剂用量:mg/kg日粮
基础日粮为小麦-豆粕型,不含基础叶黄素,其组成与配比为,小麦71%+豆粕16%+石粉8%+复合预混料5%。日粮主要营养指标符合国家GB/T5916-2008标准要求。
试验鸡群同处一幢半开放式鸡舍,饲养条件基本一致,三层笼养,按常规生产进行管理。饲喂21天后每组取蛋品进行分析。
1.2 指标分析方法
指标方析同实施例1,其中蛋黄重量改为8g。
2 试验结果
由表3可见,各组蛋黄提取液的λmax测定值间有明显的差异性,与A组相比,B、C组的结果显著提高。
表2-2各试验组蛋黄提取液的λ max测定值 nm
A组(含有叶黄素,但不含酮基类胡萝卜素)的最大吸收波长λmax小于450,B组(含有叶黄素和角黄素)和C组(含有叶黄素和虾青素)最大吸收波长明显高于A组,且均大于450。
上述实施例用来解释说明本发明,而不是对本发明进行限制,在本发明的精神和权利要求的保护范围内,对本发明作出的任何修改和改变,都落入本发明的保护范围。
机译: 用于靶中酮基类胡萝卜素生产的新型酮洛森
机译: 用于靶中酮基类胡萝卜素生产的新型酮洛森
机译: 一种新型禽饲料的制备方法,用于富集蛋黄中的类胡萝卜素