一种利用食品级启动子表达牛肉风味强化肽的方法

摘要

本发明公开了一种食品级表达载体的构建方法，涉及生物技术领域。通过分子生物学手段将甲醇诱导启动子AOX替换成组成型、半乳糖诱导型启动子，这两种类型启动子不需甲醇诱导没有食用安全隐患，是食品级表达启动子。本发明所提供的组成型、半乳糖诱导型启动子通过PCR扩增得到，并在序列两端引入酶切位点EcoR I、Not I，通过这两个酶切位点将其连接到各种表达载体中。将载体线性化后通过电转化整合到毕赤酵母的基因组中。通过摇瓶发酵得到高产量的牛肉风味强化肽目的产物，并通过中空纤维进行浓缩，浓缩后的发酵液通过美拉德呈味反应有浓郁的牛肉香味。