一种冰冻南极磷虾总虾青素的快速低温提取方法

摘要

本发明涉及一种冰冻南极磷虾总虾青素的快速低温提取方法，包括：(1)将南极磷虾冰冻原料直接加入乙酸乙酯与乙二醇单甲醚的混合溶剂中，然后粉碎匀浆，离心，上层为酯醚混合溶液清液，下层为水和虾糜混合物；(2)取酯醚混合溶液清液，减压回收溶剂后干燥，得到深红色粘稠油状物，即南极磷虾总虾青素提取物；(3)将南极磷虾总虾青素提取物溶解于无水乙醇中形成300-500mg/mL的溶液，分离，收集。本发明的工艺简单，温度低、操作时间短，可有效降低制备过程中氧化变质的危险，所得产品中总虾青素含量大于等于0.5％。

说明书

技术领域

本发明属南极磷虾虾青素的制备领域，特别是涉及一种冰冻南极磷虾总虾青素的快速 低温提取方法。

背景技术

南极磷虾，也称南极大磷虾，拉丁名Euphausia superba Dana，甲壳类，是南极附近海 域蕴藏量最大的海洋浮游生物，现有生物量高达6.5～10.0亿吨。南极磷虾中蛋白质、脂类 等活性成分丰富，尤其是脂类成分中富含ω-3多不饱和脂肪酸、虾青素类成分等，具有很 高的营养价值和抗氧化功效。其中，虾青素类成分主要是虾青素(Astaxanthin，又叫虾黄 素，即3，3′-二羟基-4，4′-二酮-β胡萝卜素，＞80％)，还包括部分虾青素单脂肪酸酯、虾青 素双脂肪酸酯等，在抗氧化及消除自由基方面具有较高的能力。因此，从资源丰富的南极 磷虾中制备以上各种虾青素类成分的混合物，即总虾青素，具有较为广阔的应用前景。

海洋动物脂类成分的常规化学溶剂提取方法一般包括以下过程：冰冻个体解冻、切片 粉碎，或冻干个体粉碎，然后用有机溶剂或/和水提取制备得到总提取物，所用的有机溶剂 可采用醇类，如乙醇，甲醇；将总提取物溶于水或甲醇水溶液后，以较高沸点烷烃(石油 醚、正己烷、环己烷)，或乙酸乙酯等酯类、氯仿或二氯甲烷等卤代烃类溶剂萃取，取溶 剂萃取相，回收溶剂后干燥即得到脂类成分部位，其中所用的烷烃(或酯类、卤代烃类) 溶剂优选采用环己烷或乙酸乙酯。脂类成分也可以直接通过上述烷烃、酯类或卤代烃类溶 剂提取、或者二氧化碳(CO₂)超临界萃取获得。

南极磷虾中虾青素类成分在较高温度下极易氧化变质，为获得高质量的南极磷虾总虾 青素，必需采用针对性的低温提取制备工艺。针对南极磷虾来源的总虾青素的低温提取方 法目前尚无文献报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种冰冻南极磷虾总虾青素的快速低温提取方法， 该工艺简单，温度低、操作时间短，可有效降低制备过程中氧化变质的危险，所得产品中 总虾青素含量大于等于0.5％。

本发明的一种冰冻南极磷虾总虾青素的快速低温提取方法，包括：

(1)将南极磷虾冰冻原料直接加入体积比为1∶1-5∶1的乙酸乙酯与乙二醇单甲醚的混合溶剂 中，然后粉碎匀浆，离心，上层为酯醚混合溶液清液，下层为水和虾糜混合物；

(2)取上述酯醚混合溶液清液，减压回收溶剂后干燥，得到深红色粘稠油状物，即南极磷虾 总虾青素提取物；

(3)将上述南极磷虾总虾青素提取物溶解于无水乙醇中形成300-500mg/mL的溶液，分离， 收集深红色粘稠油状物即为南极磷虾总虾青素。

所述步骤(1)中的南极磷虾冰冻原料为-18℃或更低至-30℃的冰冻原料。

所述步骤(1)中的每公斤南极磷虾冰冻原料加1L-3L上述混合溶剂。

所述步骤(1)中的乙酸乙酯与乙二醇单甲醚的体积比为1∶1-5∶1，优选2∶1。

所述步骤(1)中的粉碎匀浆的时间优选为6min。

所述步骤(1)中的离心的条件优选为4℃低温离心6min，转速6500转/min。

所述步骤(1)中的水和虾糜混合物按照每公斤原料加1L-3L上述混合溶剂，重复1次匀 浆、离心过程，收集上层的酯醚混合溶液清液；然后与步骤(1)中的酯醚混合溶液清液混合 进行剩余的步骤。

所述步骤(3)中的分离选取Sephadex LH-20凝胶过滤色谱柱，按照每30-50mL柱床体 积1mL的样品溶液的比例上样，经无水乙醇洗脱，收集红色色段，水浴≤40℃减压浓缩 回收无水乙醇，即得。

本发明中提取的总虾青素含量大于等于0.50％。

有益效果

本发明的突出特点是为南极磷虾总虾青素提供了新的快速低温制备方法，其制备工艺 简单，具有提取温度低、操作时间短的优点，可有效降低制备过程中氧化变质的危险，所 得产品中总虾青素含量大于等于0.5％。南极磷虾的原料来源丰富、价廉，制备的总虾青 素，有很好的开发利前景，可用于制备功能性食品等。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而 不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人 员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定 的范围。

实施例1

南极磷虾-18℃冰冻个体每次取2.0kg，选取乙酸乙酯与乙二醇单甲醚体积比2∶1的酯 醚混合溶剂，直接加4L形成低温混合物，再粉碎匀浆6min；4℃低温离心6min，转速 6500转/min；离心后倾倒收集上层酯醚混合溶液；下层水和肉糜混合物再加4L酯醚混合 溶剂重复1次匀浆、离心过程；合并2次的上层酯醚混合溶液，减压浓缩回收溶剂，干燥， 得到深红色粘稠油状物，即南极磷虾总虾青素提取物。重复多次提取，产品在50.8-63.2 克之间，其提取率为2.54-3.16％。

南极磷虾总虾青素提取物、总虾青素中的虾青素类成分含量采用紫外-可见分光光度计 法进行分析，测定时，将虾青素标准样品在其CHCl₃溶液中按照《中国药典》(2005年版) 附录VA紫外-可见分光光度法测定工作曲线，再配制一定浓度的待测样品溶液，测定其吸 光度，利用工作曲线计算南极磷虾总虾青素提取物、总虾青素中的虾青素含量。经紫外- 可见分光光度计法分析，南极磷虾总虾青素提取物中总虾青素的含量以标准品虾青素计 算，为0.334-0.388％。

实施例2

南极磷虾-18℃冰冻个体取2.0kg，选取选取乙酸乙酯与乙二醇单甲醚体积比2∶1的酯 醚混合溶剂，加2.4L该酯醚混合溶剂，按实施例1流程提取南极磷虾总虾青素提取物， 得产品51.6g，其提取率为2.58％。经紫外-可见分光光度计法分析，本法提取的南极磷虾 总虾青素提取物中总虾青素的含量以标准品虾青素计算，为0.346％。

实施例3

南极磷虾-18℃冰冻个体取2.0kg，选取选取乙酸乙酯与乙二醇单甲醚体积比1∶1的酯 醚混合溶剂，加4.0L该酯醚混合溶剂，按实施例1流程提取南极磷虾总虾青素提取物， 产品58.7g，其提取率为2.94％。经紫外-可见分光光度计法分析，本法提取的南极磷虾总 虾青素提取物中总虾青素的含量以标准品虾青素计算，为0.386％。

实施例4

按实施例1提取获得的南极磷虾总虾青素提取物每次取3.0g，溶解于无水乙醇形成 10mL浓溶液，选取柱床体积300mL的Sephadex LH-20凝胶过滤色谱柱，上样，经无水 乙醇洗脱，收集红色色段，水浴≤40℃减压浓缩回收无水乙醇，避光干燥，得深红色粘稠 油状物，即为南极磷虾总虾青素产品，多次重复实验得到的产品在2.00-2.45g之间。经紫 外-可见分光光度计法分析，该法制备得到的产品中总虾青素含量为0.508-0.557％。