一种乳酸球菌来源的X－脯氨酰－二肽氨肽酶及其制法和用途

摘要

本发明通过基因工程技术克隆到乳酸球菌(Lactococcus lactis)的X－脯氨酰－二肽氨肽酶，该酶能能特异的识别多肽或蛋白质氨基端第二位的脯氨酸，并将其碳端肽键水解，从而去除氨基端的X－脯氨酸二肽。将该酶基因置于表达质粒pET17b的T7启动子下游，重组质粒转入大肠杆菌BL21中表达，X－脯氨酰－二肽氨肽酶的表达量占菌体总蛋白的50％。酶经渗透压法破碎、硫酸铵沉淀和柱层析纯化。脯氨酸－脯氨酸－胰高血糖素31肽的酶切实验表明纯化的酶能特异性地水解多肽氨基端第二个脯氨酸羧基端肽键，生成有活性的胰高血糖素。