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核酸文库构建方法、得到的核酸文库及其用途

摘要

一种核酸文库构建方法、得到的核酸文库及其用途,该方法包括:使用转座酶将核酸打断成片段,同时在打断的片段两端连接上转座子序列,转座子序列上带有生物素标记;通过链置换反应补平转座子序列与打断的片段之间的缺口,得到完整的双链核酸片段;使上一步得到的双链核酸片段环化成环状核酸片段;使用链霉素亲和性磁珠结合带有生物素标记的环状核酸片段;使用打断酶对结合在链霉素亲和性磁珠上的环状核酸片段进行打断,然后进行磁分离得到结合在链霉素亲和性磁珠上的片段。本发明针对大片段文库、满足低起始量要求,能够彻底摆脱物理打断所需的昂贵设备,其优选方案能够构建成单链环状文库,并使这种文库能用于二代测序。

著录项

  • 公开/公告号CN111379031A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2020-07-07

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 深圳华大智造科技有限公司;

    申请/专利号CN201811623521.7

  • 申请日2018-12-28

  • 分类号

  • 代理机构深圳鼎合诚知识产权代理有限公司;

  • 代理人孙银行

  • 地址 518083 广东省深圳市盐田区北山工业区综合楼及11栋2楼

  • 入库时间 2023-12-17 09:42:29

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2020-07-31

    实质审查的生效 IPC(主分类):C40B50/06 申请日:20181228

    实质审查的生效

  • 2020-07-07

    公开

    公开

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