斑节对虾白斑综合症病毒部分基因组文库及核酸探针检测法

摘要

通过分离纯化白斑综合症病毒(WSSV)粒子,抽提病毒DNA,用限制性内切酶EcoRⅠ或SalⅠ酶切后,克隆入质粒pBluescript ⅡKS中,从而建立了WSSV部分基因组文库.估计WSSV基因组DNA在165kb以上.将WSSV EcoRⅠ克隆片段标记制备为探针,进行Southern杂交、打点杂交和原位杂交,其结果证明了克隆片段对WSSV特异,并为检测WSSV提供了方法.通过对部分基因组文库序列分析发现,WSSV核酸序列与已知杆状病毒核酸序列的同源性低,与GenBank中已有病毒核酸序列比较都无较大同源性,说明WSSV不属于杆状病毒科,目前只能列为未分类的无脊椎动物病毒,其分类地位尚需更多证据方能确定.